關節(jié)腔內注射不同濃度木瓜蛋白酶建立小鼠膝骨關節(jié)炎模型的研究.pdf

1、目的:通過對昆明小鼠膝關節(jié)腔內注射不同濃度木瓜蛋白酶混合溶液及探討中醫(yī)藥治療膝骨關節(jié)炎的優(yōu)勢,明確關節(jié)腔內注射不同濃度木瓜蛋白酶建立小鼠膝骨關節(jié)炎模型的可行性,為建立重復性好、能大量運用于中醫(yī)藥實驗的骨關節(jié)炎動物模型,為尋求有效的骨關節(jié)炎治療提供實驗室支持。
　　方法:①健康10周齡雄性昆明小鼠80只,平均體重(45±3)g,按照隨機數字表法均分為2％木瓜蛋白酶組、4％木瓜蛋白酶組、8％木瓜蛋白酶組和對照組。實驗開始的第1、3、5

2、天分組行右膝關節(jié)腔內注射2％、4％、8％(w/v)木瓜蛋白酶和0.03mol/L和L-半胱氨酸的混合溶液0.25ml/kg或等量生理鹽水。②整個實驗過程觀察小鼠的一般情況、記錄體重及右膝關節(jié)寬度、關節(jié)液白細胞計數。所有小鼠首次注射后第1周用頸椎脫臼法處死,取出關節(jié)標本制成切片、常規(guī)HE染色及甲苯胺藍染色。鏡下觀察染色情況、軟骨細胞、軟骨基質、結構的改變并行Mankin評分。
　　結果:①造模組的右膝關節(jié)均出現腫脹、屈伸功能障礙、跳

3、步、拖步、活動減少等膝骨關節(jié)炎癥狀,并檢測到膝關節(jié)寬度增大;②病理切片觀察:造模組染色變淺、軟骨層變薄、基質分解破壞等病理學改變,并隨木瓜蛋白酶濃度的增高而嚴重程度加重,對照組無上述改變;③脛右膝骨平臺Mankin評分:對照組與各造模組間Mankin評分的差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。各造模組間脛骨平臺的 Mankin評分隨木瓜蛋白酶濃度增加而增高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　結論:昆明小鼠膝關節(jié)腔內注射2％、4