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1、目的:白細(xì)胞介素-4(interleukin-4,IL-4)是一種Th2型細(xì)胞因子,它在過(guò)敏反應(yīng)的發(fā)生中起到重要作用。有人提出IL-4與過(guò)敏性結(jié)膜炎發(fā)病過(guò)程中嗜酸性粒細(xì)胞(eosinophils,EOS)在眼結(jié)膜的浸潤(rùn)有關(guān)。但是否IL-4自身可以誘導(dǎo)EOS聚集至今還不清楚。本實(shí)驗(yàn)研究的是球結(jié)膜下注射IL-4是否可引起EOS在眼結(jié)膜的浸潤(rùn)。 實(shí)驗(yàn)方法:分別用不同劑量IL-4,嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子(Eotaxin)及PBS對(duì)8-12
2、周的雄性BrownNorway大鼠進(jìn)行球結(jié)膜下注射,24小時(shí)后采集結(jié)膜組織進(jìn)行組織學(xué)染色,分析結(jié)膜內(nèi)細(xì)胞浸潤(rùn)情況。給BrownNorway大鼠球結(jié)膜下注射IL-4200ng,6、12、18、24小時(shí)后采集結(jié)膜組織進(jìn)行免疫組化染色,分析結(jié)膜內(nèi)細(xì)胞浸潤(rùn)情況,采集的結(jié)膜組織也同時(shí)被用于RT-PCR分析以檢測(cè)相關(guān)趨化因子的表達(dá)。另有一組實(shí)驗(yàn)用來(lái)檢測(cè)γ干擾素(interferon-gamma,IFN-γ)與IL-4同時(shí)應(yīng)用時(shí)所產(chǎn)生的作用。
3、 結(jié)果:球結(jié)膜下注射IL-4誘導(dǎo)EOS在眼結(jié)膜的浸潤(rùn)數(shù)量呈劑量依賴型增加,且IL-4的作用效力與Eotaxin相同。EOS在眼結(jié)膜的浸潤(rùn)于球結(jié)膜下注射IL-4后6小時(shí)開始,至少可持續(xù)至24小時(shí)。其他類型的細(xì)胞浸潤(rùn)也可被檢測(cè)到,但與PBS對(duì)照組作用效果無(wú)顯著性差別。RT-PCR分析證實(shí)球結(jié)膜下注射IL-4不能上調(diào)對(duì)EOS有趨化作用的因子在結(jié)膜組織的表達(dá)。IFN-γ與IL-4同時(shí)應(yīng)用可抑制由IL-4引起的EOS在眼結(jié)膜的選擇性聚集。
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