妊娠期高血壓疾病患者中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)的表達(dá)及其與疾病嚴(yán)重程度的相關(guān)性研究.pdf

1、妊娠期高血壓疾病(hypertension disorder complicating pregnancy,HDP)是妊娠期嚴(yán)重危害母嬰安全的重要疾病,發(fā)病機(jī)制尚不明確,研究者們普遍認(rèn)為妊娠期高血壓疾病的發(fā)生是多因素多途徑共同致病的,其中心環(huán)節(jié)是母體全身彌漫性內(nèi)皮細(xì)胞的激活和(或)損傷,由此帶來(lái)了各種臨床癥狀如高血壓、蛋白尿、全身炎癥反應(yīng)以及抗血管生成因子的聚集。內(nèi)皮細(xì)胞激活和損傷的機(jī)制不明,但有學(xué)者指出妊娠期高血壓疾病內(nèi)皮的損傷在早孕

2、期即存在,內(nèi)皮激活導(dǎo)致滋養(yǎng)細(xì)胞對(duì)子宮螺旋動(dòng)脈的浸潤(rùn)障礙,胎盤淺著床,胎盤缺血、缺氧以致其合成和釋放過(guò)多的“毒性因子”進(jìn)入循環(huán),直接或間接損傷母體內(nèi)皮細(xì)胞的功能。目前已知的與疾病發(fā)生相關(guān)的“毒性因子”包括腫瘤壞死因子、可溶性fm樣酪氨酸激酶1(sFlt-1)和endoglin(sEng)、合體滋養(yǎng)層細(xì)胞微粒(STBM)等,有學(xué)者對(duì)這些因子與妊娠期高血壓疾病發(fā)病的預(yù)測(cè)能力進(jìn)行研究,遺憾的是這些因子并不能很好的預(yù)測(cè)疾病的發(fā)生和發(fā)展。因此我們希

3、望能夠通過(guò)某種途徑了解內(nèi)皮損害的情況,判定疾病發(fā)生和發(fā)展的程度,盡早的給予合理的預(yù)防和治療,這對(duì)于臨床診斷和治療妊娠期高血壓疾病是具有重要意義的。
　　 本課題通過(guò)對(duì)不同階段妊娠期高血壓疾病患者血液、尿液以及胎盤組織中NGAL的測(cè)定,了解妊娠晚期患者不同組織中NGAL的表達(dá),并結(jié)合其臨床特征,探求NGAL與疾病嚴(yán)重程度的相關(guān)性,希望找到一個(gè)有效的指標(biāo),能夠簡(jiǎn)單、快速的判定疾病發(fā)展的程度,在疾病發(fā)生的早期即給予干預(yù)和治療,延緩疾病

4、的發(fā)生和發(fā)展,監(jiān)測(cè)疾病的治療效果,降低高危妊娠的發(fā)生率,改善母兒預(yù)后。
　　 第一章 妊娠期高血壓疾病患者血、尿及胎盤組織中NGAL的表達(dá)
　　 [目的]
　　 妊娠期高血壓疾病患者均存在不同程度的全身炎癥反應(yīng)和內(nèi)皮損害,我們通過(guò)檢測(cè)其外周血、尿液及胎盤組織中NGAL的表達(dá),初步探求NGAL在妊娠期高血壓疾病的發(fā)病過(guò)程中的作用和意義。
　　 [方法]
　　 1、實(shí)驗(yàn)分組:選擇2009年3月至200

5、9年12月在南方醫(yī)院及深圳市婦幼保健院因妊娠期高血壓疾病住院的孕婦共86例,排除慢性高血壓史、妊娠期糖尿病或糖尿病合并妊娠、感染、慢性腎炎、紅斑狼瘡史、自發(fā)性胎膜早破、胎兒生長(zhǎng)受限、胎兒畸形及輔助生殖等因素后,共獲得妊娠期高血壓疾病患者38例,其中妊娠期高血壓組9例、晚發(fā)型子癇前期17例(包括輕度子癇前期組7例、重度子癇前期組10例),早發(fā)型子癇前期12例,所有診斷均在分娩12周后最終確診。選擇同期足月妊娠并分娩健康新生兒的孕婦為正常對(duì)

6、照組共30例。
　　 2、標(biāo)本采集:兩組均于入院24小時(shí)內(nèi)抽肘靜脈血3ml,于入院第2日取晨尿3ml,于分娩時(shí)胎盤娩出后,取近臍根部母體面胎盤組織2.0cm × 1.0cm × 0.2cm,平均分成兩個(gè)部分,一部分與經(jīng)過(guò)處理后的血液和尿液標(biāo)本置入-80℃冰箱保存?zhèn)溆?另一部分置入4％甲醛4℃保存?zhèn)溆谩?br>　　 3、NGAL的檢測(cè):采用ELISA法檢測(cè)兩組孕婦血液和尿液中NGAL的表達(dá),免疫組化法和Westen Blot法檢

7、測(cè)胎盤組織中NGAL的表達(dá)。
　　 4、應(yīng)用SPSS13.O軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)進(jìn)行組間比較,p<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 [結(jié)論]
　　 妊娠期高血壓疾病患者血液、尿液及胎盤組織中均有NGAL的表達(dá),與正常對(duì)照組比較妊娠期高血壓疾病組血液及尿液中NGAL水平顯著升高,同一患者血液中NGAL含量與尿液中NGAL含量具有正相關(guān)性。妊娠期高血壓疾病患者妊娠晚期體內(nèi)NGAL的異常表達(dá)為我們進(jìn)一步研究

8、NGAL與疾病嚴(yán)重程度的相關(guān)性奠定了基礎(chǔ)。
　　 第二章 妊娠期高血壓疾病患者NGAL水平與疾病嚴(yán)重程度的相關(guān)性分析
　　 [目的]
　　 妊娠期高血壓疾病患者NGAL的顯著升高與全身炎癥反應(yīng)和內(nèi)皮損害有關(guān),我們分別檢測(cè)不同嚴(yán)重程度妊娠期高血壓疾病患者血液及尿液中NGAL含量以探求NGAL是否與妊娠期高血壓疾病病情的嚴(yán)重程度相關(guān)。
　　 [方法]
　　 1、ELISA法檢測(cè)不同嚴(yán)重程度妊娠期高血壓

9、疾病患者血液及尿液中NGAL的含量；
　　 2、病例組臨床特征的采集:(1)基本情況,年齡、發(fā)病孕周、病程等；(2)臨床癥狀,入院時(shí)血壓、體征及自覺(jué)癥狀；(3)輔助檢查,血尿常規(guī)、肝腎功能、24小時(shí)尿蛋白。
　　 3、應(yīng)用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,應(yīng)用單因素方差分析Welch法檢測(cè)方差齊性,因方差不齊應(yīng)用Games-Howell進(jìn)行組間多重比較；用Pearson相關(guān)分析法對(duì)妊娠期高血壓疾病患者的臨床特征及NGA

10、L含量進(jìn)行相關(guān)性分析；用Spearman rho分析法對(duì)妊娠期高血壓疾病患者疾病嚴(yán)重程度與NGAL含量進(jìn)行相關(guān)性分析。p<0.05為有顯著性差異。
　　 [結(jié)論]
　　 不同嚴(yán)重程度妊娠期高血壓疾病患者血液和胎盤組織中NGAL的表達(dá)具有差異,NGAL的含量隨著患者血壓和尿蛋白的升高而增加,進(jìn)一步分析證實(shí)NGAL含量與疾病的嚴(yán)重程度高度相關(guān),血液NGAL可以作為預(yù)測(cè)疾病嚴(yán)重程度的一個(gè)重要的指標(biāo)。
　　 第三章 早發(fā)

11、型子癇前期患者NGAL表達(dá)及臨床特征的相關(guān)性分析
　　 [目的]
　　 早發(fā)型子癇前期是妊娠期高血壓疾病的一種特殊類型,具有發(fā)病早、程度重、并發(fā)癥多、母兒預(yù)后不良等特點(diǎn),嚴(yán)重威脅母嬰健康及生命安全。本研究通過(guò)檢測(cè)早發(fā)型子癇前期患者血液、尿液及胎盤組織中NGAL的含量,探求NGAL在早發(fā)型子癇前期發(fā)生和發(fā)展中的作用,并結(jié)合其臨床特征進(jìn)行相關(guān)性分析,為監(jiān)測(cè)疾病進(jìn)展及治療效果提供可靠的依據(jù)。
　　 [方法]
　　

12、 1、實(shí)驗(yàn)分組:選擇2009年3月至2009年12月在南方醫(yī)院及深圳市婦幼保健院因妊娠期高血壓疾病住院的孕婦共86例,排除慢性高血壓史、妊娠期糖尿病或糖尿病合并妊娠、感染、慢性腎炎、紅斑狼瘡史、自發(fā)性胎膜早破、胎兒生長(zhǎng)受限、胎兒畸形及輔助生殖等因素后,共獲得晚發(fā)型子癇前期17例,早發(fā)型子癇前期12例,所有診斷均在分娩12周后最終確診。選擇同期足月妊娠并分娩健康新生兒的孕婦為正常對(duì)照組共30例。
　　 2、標(biāo)本采集:兩組均于入院

13、24小時(shí)內(nèi)抽肘靜脈血3ml,于入院第2日取晨尿3ml,于分娩時(shí)胎盤娩出后,立即取近臍根部母體面胎盤組織2.0cm × 1.0cm ×0.2cm,平均分成兩個(gè)部分,一部分與經(jīng)過(guò)處理后的血液和尿液標(biāo)本置入-80℃冰箱保存?zhèn)溆?另一部分置入4％甲醛4℃保存?zhèn)溆谩?br>　　 3、NGAL的檢測(cè):采用ELISA試劑盒檢測(cè)兩組孕婦血液和尿液中NGAL,免疫組化法和Western Blot法檢測(cè)胎盤組織中NGAL的表達(dá)。
　　 4、SPS

14、S13.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,應(yīng)用單因素方差分析Welch法檢測(cè)方差齊性,因方差不齊應(yīng)用Games-Howell進(jìn)行組間多重比較,p<0.05有顯著性差異。
　　 [結(jié)論]
　　 早發(fā)型子癇前期組患者體內(nèi)的NGAL異常高表達(dá),與其血壓高以及尿蛋白迅速增加的臨床特點(diǎn)相符,可能提示這類患者存在嚴(yán)重的內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙及全身系統(tǒng)性炎性反應(yīng)。NGAL在判別早發(fā)型子癇前期患者病情嚴(yán)重程度及監(jiān)測(cè)妊娠期腎功能損傷中具有重要意義。
　　

15、 第四章 NGAL在妊娠期高血壓疾病臨床診斷和治療中的應(yīng)用
　　 [目的]
　　 通過(guò)前期研究發(fā)現(xiàn)NGAL在妊娠期高血壓疾病患者中過(guò)度表達(dá)且與病情的嚴(yán)重程度高度相關(guān),下一步我們擬量化NGAL在妊娠期高血壓疾病發(fā)生和發(fā)展中的作用,為預(yù)測(cè)疾病發(fā)生、監(jiān)測(cè)疾病進(jìn)展及治療效果提高可靠的依據(jù)。
　　 [方法]
　　 1、行ROC曲線分析
　　 2、利用逐步判別分析法建立預(yù)測(cè)疾病嚴(yán)重程度的公式；
　　

16、 3、進(jìn)行回代性考核、交叉核實(shí)法及前瞻性考核驗(yàn)證公式的有效性。
　　 [結(jié)論]
　　 NGAL對(duì)于妊娠期高血壓疾病具有較好診斷價(jià)值,結(jié)合NGAL與臨床特征建立的預(yù)測(cè)疾病嚴(yán)重程度的判別公式能夠初步評(píng)估妊娠期高血壓疾病患者的病情,監(jiān)測(cè)疾病的進(jìn)展和治療效果,為臨床的診斷和治療提供依據(jù)。
　　 全文小結(jié)
　　 1、妊娠期高血壓疾病患者妊娠晚期血液、尿液及胎盤組織中均有NGAL的表達(dá),較正常妊娠婦女有顯著性升高。其

17、中同一患者血液及尿液中NGAL具有一定相關(guān)性。
　　 2、不同嚴(yán)重程度的妊娠期高血壓疾病患者體內(nèi)的NGAL含量有顯著性差異,NGAL與患者血壓和尿蛋白具有正相關(guān)性,隨著血壓升高,尿蛋白含量增加,NGAL也隨之升高；血液中NGAL含量與疾病的嚴(yán)重程度高度相關(guān)。
　　 3、早發(fā)型子癇前期組患者體內(nèi)的NGAL異常高表達(dá),提示這類患者存在嚴(yán)重的內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙及全身系統(tǒng)性炎性反應(yīng)。NGAL在判別早發(fā)型子癇前期患者病情嚴(yán)重程度及監(jiān)

18、測(cè)妊娠期腎功能損傷中也具有重要意義。
　　 4、NGAL對(duì)于妊娠期高血壓疾病具有較好診斷價(jià)值,結(jié)合NGAL與臨床特征建立的預(yù)測(cè)疾病嚴(yán)重程度的判別公式能夠初步評(píng)估妊娠期高血壓疾病患者的病情,監(jiān)測(cè)疾病的進(jìn)展和治療效果,為臨床的診斷和治療提供依據(jù)。
　　 5、NGAL在妊娠期高血壓疾病的發(fā)生和發(fā)展中均具有重要意義:血液中NGAL水平可以篩查疾病的發(fā)生,預(yù)測(cè)疾病的嚴(yán)重程度；尿液中NGAL可以作為協(xié)助診斷妊娠期腎功能損傷的參考因素