茶葉功能成分對5-6腎切除合并高尿酸血癥大鼠腎損傷的治療作用及其機制研究.pdf

1、目的:觀察茶葉功能成分配方對5/6腎切除合并高尿酸血癥大鼠腎損傷的修復作用，并探討其可能機制。
　　方法:
　　1、96只健康雌性清潔級SD大鼠隨機分為四組:假手術組（Sham組）、5/6腎切除組（RK組）、5/6腎切除+氧嗪酸組(RK+OA組)、氧嗪酸組（OA組）。每組24只，分別于4周、8周、12周三個時間點收集24小時尿液后各處死8只大鼠，留取血、腎組織。
　　2、120只健康雌性清潔級SD大鼠隨機分為五組:假手

2、術組(Sham組)、5/6腎切除組（RK組）、5/6腎切除+氧嗪酸組（RK+OA組）、5/6腎切除+氧嗪酸+茶葉功能成分組（RK+OA+Tea組）、5/6腎切除+氧嗪酸+別嘌呤醇組（RK+OA+AP組）。每組24只，分別于4周、8周、12周三個時間點收集24小時尿液后各處死8只大鼠，留取血、腎組織。
　　3、雙縮脲法測定尿蛋白含量;全自動生化分析儀檢測血尿酸、肌酐、尿素氮;HE染色及PAS染色檢查腎臟病理改變;免疫組化染色觀察腎小

3、球入球小動脈α-SMA表達、腎間質微血管密度（CD34表達養(yǎng)性）、腎小管上皮細胞增殖細胞核抗原(PCNA)和轉化生長因子β(TGF-β)表達水平;TUNEL法觀察腎小管凋亡情況;ELISA法檢測血清XO、NADPH氧化酶、腎皮質AngⅡ濃度，Western blot法檢測腎組織KLF-5、磷酸化p38MAPK蛋白表達。
　　結果:
　　1、RK組大鼠各時間點24小時尿蛋白、血肌酐、尿素氮均較Sham組增高(P＜0.05)，出

4、現(xiàn)明顯的腎小球增生、肥大、硬化，腎小管變性、擴張、萎縮，腎間質炎性細胞浸潤，纖維化形成;腎小球入球小動脈輕度增生，管周毛細血管丟失，腎小管上皮細胞凋亡增加，TGF-β表達增加。
　　2、RK+OA組大鼠各時間點24小時尿蛋白（12周除外）、血尿酸、血肌酐、尿素氮均較RK組增高(P＜0.05)，腎小球增生、硬化，腎間質纖維化明顯加重;腎小球入球小動脈明顯增殖，微血管密度顯著下降，腎小管上皮凋亡明顯增加，而增生減少，TGF-β表達明顯

5、增加。血尿酸水平與24小時尿蛋白量、血尿素氮和肌酐水平以及腎小管間質評分呈正相關性。
　　3、RK+OA+Tea組大鼠各時間點血尿酸、尿素氮、肌酐及尿蛋白水平明顯減低(P＜0.05)，腎小球增生及間質纖維化顯著改善，腎小球入球小動脈的增殖，間質微血管的丟失明顯改善，腎小管上皮細胞的凋亡明顯減少而增殖增加，腎小管TGF-β的表達減少。與RK+OA+AP比較，RK+OA+Tea組大鼠的各項腎損傷指標均改善得更為明顯。
　　4、R

6、K+OA組各時間點血清OX較RK組及Sham組增高，RK+OA+Tea組較RK+OA組明顯減低(P＜0.05)。
　　5、RK+OA組各時間點血清NADPH氧化酶，腎皮質AngⅡ，腎組織磷酸化p38MAPK、KLF-5均較RK組明顯增高(P＜0.05)。
　　6、RK+OA+Tea組各時間點血清NADPH氧化酶，腎皮質AngⅡ，腎組織磷酸化p38MAPK、KLF-5均較RK+OA組明顯減低(P＜0.05)。
　　結論:

7、
　　1、成功構建了5/6腎切除合并高尿酸血癥的動物模型。
　　2、茶葉功能成分配方可顯著改善5/6腎切除合并高尿酸血癥大。鼠腎損傷:降低其血清尿酸濃度、減輕其尿蛋白，并明顯改善腎功能、減輕入球小動脈平滑肌的增殖及間質毛細血管的丟失、減輕腎小管上皮細胞的凋亡，并促進其增殖、減輕腎間質纖維化。
　　3、茶葉功能成分配方可能通過抑制黃嘌呤氧化酶，減少尿酸生成，從而使血尿酸水平降低;通過減少AngⅡ、抑制NADPH氧化酶減輕