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文檔簡介
1、目的:觀察茶葉功能成分配方對5/6腎切除合并高尿酸血癥大鼠腎損傷的修復(fù)作用,并探討其可能機制。
方法:
1、96只健康雌性清潔級SD大鼠隨機分為四組:假手術(shù)組(Sham組)、5/6腎切除組(RK組)、5/6腎切除+氧嗪酸組(RK+OA組)、氧嗪酸組(OA組)。每組24只,分別于4周、8周、12周三個時間點收集24小時尿液后各處死8只大鼠,留取血、腎組織。
2、120只健康雌性清潔級SD大鼠隨機分為五組:假手
2、術(shù)組(Sham組)、5/6腎切除組(RK組)、5/6腎切除+氧嗪酸組(RK+OA組)、5/6腎切除+氧嗪酸+茶葉功能成分組(RK+OA+Tea組)、5/6腎切除+氧嗪酸+別嘌呤醇組(RK+OA+AP組)。每組24只,分別于4周、8周、12周三個時間點收集24小時尿液后各處死8只大鼠,留取血、腎組織。
3、雙縮脲法測定尿蛋白含量;全自動生化分析儀檢測血尿酸、肌酐、尿素氮;HE染色及PAS染色檢查腎臟病理改變;免疫組化染色觀察腎小
3、球入球小動脈α-SMA表達、腎間質(zhì)微血管密度(CD34表達養(yǎng)性)、腎小管上皮細胞增殖細胞核抗原(PCNA)和轉(zhuǎn)化生長因子β(TGF-β)表達水平;TUNEL法觀察腎小管凋亡情況;ELISA法檢測血清XO、NADPH氧化酶、腎皮質(zhì)AngⅡ濃度,Western blot法檢測腎組織KLF-5、磷酸化p38MAPK蛋白表達。
結(jié)果:
1、RK組大鼠各時間點24小時尿蛋白、血肌酐、尿素氮均較Sham組增高(P<0.05),出
4、現(xiàn)明顯的腎小球增生、肥大、硬化,腎小管變性、擴張、萎縮,腎間質(zhì)炎性細胞浸潤,纖維化形成;腎小球入球小動脈輕度增生,管周毛細血管丟失,腎小管上皮細胞凋亡增加,TGF-β表達增加。
2、RK+OA組大鼠各時間點24小時尿蛋白(12周除外)、血尿酸、血肌酐、尿素氮均較RK組增高(P<0.05),腎小球增生、硬化,腎間質(zhì)纖維化明顯加重;腎小球入球小動脈明顯增殖,微血管密度顯著下降,腎小管上皮凋亡明顯增加,而增生減少,TGF-β表達明顯
5、增加。血尿酸水平與24小時尿蛋白量、血尿素氮和肌酐水平以及腎小管間質(zhì)評分呈正相關(guān)性。
3、RK+OA+Tea組大鼠各時間點血尿酸、尿素氮、肌酐及尿蛋白水平明顯減低(P<0.05),腎小球增生及間質(zhì)纖維化顯著改善,腎小球入球小動脈的增殖,間質(zhì)微血管的丟失明顯改善,腎小管上皮細胞的凋亡明顯減少而增殖增加,腎小管TGF-β的表達減少。與RK+OA+AP比較,RK+OA+Tea組大鼠的各項腎損傷指標(biāo)均改善得更為明顯。
4、R
6、K+OA組各時間點血清OX較RK組及Sham組增高,RK+OA+Tea組較RK+OA組明顯減低(P<0.05)。
5、RK+OA組各時間點血清NADPH氧化酶,腎皮質(zhì)AngⅡ,腎組織磷酸化p38MAPK、KLF-5均較RK組明顯增高(P<0.05)。
6、RK+OA+Tea組各時間點血清NADPH氧化酶,腎皮質(zhì)AngⅡ,腎組織磷酸化p38MAPK、KLF-5均較RK+OA組明顯減低(P<0.05)。
結(jié)論:
7、
1、成功構(gòu)建了5/6腎切除合并高尿酸血癥的動物模型。
2、茶葉功能成分配方可顯著改善5/6腎切除合并高尿酸血癥大。鼠腎損傷:降低其血清尿酸濃度、減輕其尿蛋白,并明顯改善腎功能、減輕入球小動脈平滑肌的增殖及間質(zhì)毛細血管的丟失、減輕腎小管上皮細胞的凋亡,并促進其增殖、減輕腎間質(zhì)纖維化。
3、茶葉功能成分配方可能通過抑制黃嘌呤氧化酶,減少尿酸生成,從而使血尿酸水平降低;通過減少AngⅡ、抑制NADPH氧化酶減輕
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