四川省動(dòng)物源金黃色葡萄球菌耐藥表型檢測(cè)及主要耐藥機(jī)制研究.pdf

1、金黃色葡萄球菌是常見的人獸共患病原菌，對(duì)其進(jìn)行耐藥性研究具有重要意義。由于獸醫(yī)臨床抗菌藥物的不規(guī)范使用，動(dòng)物源金黃色葡萄球菌耐藥性日益嚴(yán)重。對(duì)動(dòng)物源金黃色葡萄球菌進(jìn)行藥物敏感性試驗(yàn)，主要耐藥基因檢測(cè)及分子流行病學(xué)研究，有助于了解耐藥菌株的產(chǎn)生和傳播趨勢(shì)，為臨床合理、規(guī)范用藥提供理論依據(jù)。
　　本文自2007年到2013年從不同動(dòng)物源共分離得到236株金黃色葡萄球菌。對(duì)分離菌株進(jìn)行對(duì)11種抗生素的藥物敏感性檢測(cè)后發(fā)現(xiàn)，除對(duì)苯唑西林表

2、現(xiàn)出較高敏感性（敏感率大于80％）外，對(duì)其他藥物呈不同水平耐藥性，菌株對(duì)青霉素、氨芐西林、慶大霉素、卡那霉素、阿米卡星、紅霉素、阿奇霉素、四環(huán)素、環(huán)丙沙星和磺胺異噁唑的耐藥率分別達(dá)92.8％、90.25％、47.88％、36.87％、39.83％、77.12％、58.47％、40.68％、26.28％、87.71％。本次菌株多重耐藥現(xiàn)象嚴(yán)重，以6耐、9耐菌株為主。隨著時(shí)間推移，菌株對(duì)不同抗菌藥物耐藥率呈上升趨勢(shì)。不同動(dòng)物源菌株耐藥性比較

3、可見，豬源菌株對(duì)紅霉素、阿奇霉素耐藥率顯著高于禽源金黃色葡萄球菌(P＜0.05)，而對(duì)其余9種藥物的耐藥率在不同動(dòng)物源菌株間無顯著性差異.(P＞0.05)。
　　金黃色葡萄球菌血漿凝固酶檢測(cè)試驗(yàn)顯示，236株金黃色葡萄球菌菌株中檢出159株血漿凝固酶陽性菌株;且血漿凝固酶陽性菌株對(duì)青霉素G、苯唑西林、慶大霉素、卡那霉素、阿米卡星、環(huán)丙沙星耐藥率顯著高于血漿凝固酶陰性菌株(P＜0.05)，多重耐藥譜較血漿凝固酶陰性菌株更廣泛。pvl

4、、tst毒力基因的PCR擴(kuò)增結(jié)果顯示，236株金黃色葡萄球菌尚未檢出相關(guān)毒力基因。
　　本試驗(yàn)建立了blaZ-mecA二重PCR體系及aacA-aphD-ermA-mecA三重PCR體系，以及擴(kuò)增blaZ、mecA、aacA-aphD、ermA、ermB、ermC等6種耐藥基因的普通PCR體系。不同耐藥基因的PCR擴(kuò)增結(jié)果顯示，介導(dǎo)β-內(nèi)酰胺類耐藥的基因blaZ、mecA檢出率為63.98％和10.59％;介導(dǎo)大環(huán)內(nèi)酯類、林可胺類

5、、鏈陽霉素B類(MLSB)的耐藥基因ermA、ermB、ermC檢出率分別為11.44％、83.05％和87.29％;介導(dǎo)氨基糖苷類耐藥基因aacA-aphD檢出率43.64％。檢出耐藥基因組合以blaZ+ermB+ ermC與 blaZ+ermB+ ermC+aacA-aphD為主。隨著時(shí)間推移，菌株攜帶多耐藥基因種類增加。
　　對(duì)24株mecA基因介導(dǎo)的MRSA菌株進(jìn)行SCCmec分型發(fā)現(xiàn)，2008年及2009年分離株主要為H

6、A-MRSA菌株，占70.83％，2013年分離株主要為CA-MRSA，占20.83％;所有MRSA中，以SCCmecⅢ型為主，共有12株占50％。PFGE分子分型結(jié)果顯示，24株MRSA菌株共分為14個(gè)聚類組，命名為A-H組;J組為主要類型，占25％(6/24)。
　　以上結(jié)果說明，四川省不同動(dòng)物源金黃色葡萄球菌對(duì)不同抗菌藥物呈不同水平的耐藥性，菌株對(duì)藥物的耐藥率隨時(shí)間推移呈上升趨勢(shì)，獸醫(yī)臨床應(yīng)加強(qiáng)對(duì)金黃色葡萄球菌耐藥性的監(jiān)測(cè);

7、四川省不同動(dòng)物源金黃色葡萄球菌漿凝固酶陽性率高達(dá)67.37％，且血漿凝固酶陽性菌比陰性菌株具有更嚴(yán)重的多重耐藥性，說明致病性菌株長(zhǎng)期、普遍存在于金黃色葡萄球菌群中，應(yīng)加強(qiáng)對(duì)菌株血漿凝固酶以及耐藥性的檢測(cè)。本次檢測(cè)的MRSA SCCmec分型較復(fù)雜，其中以SCCmecⅢ型為主，且屬于Ⅲ型菌株攜帶的耐藥基因最多。隨分離時(shí)間的推移，菌株由HA-MRSA逐步向CA-MRSA轉(zhuǎn)變，且攜帶的耐藥基因更加豐富。MRSA菌株呈多克降流行，獸醫(yī)臨床應(yīng)長(zhǎng)期