孕激素相關(guān)受體在不同肺腺癌細(xì)胞系中的表達(dá)情況.pdf

1、目的:
　　近年來，非小細(xì)胞肺癌(Non-small Cell Lung Cancer，NSCLC)的發(fā)生發(fā)展與性激素的關(guān)系越來越受到研究者的重視。雌激素能促進(jìn)肺癌的發(fā)生發(fā)展，而孕激素則可通過不同受體介導(dǎo)對肺癌產(chǎn)生促進(jìn)或抑制作用。本研究選取肺腺癌A549、A549/DDP（耐順鉑A549細(xì)胞）、肺腺癌PC-9細(xì)胞和PC-9/GR（耐吉非替尼PC-9細(xì)胞）進(jìn)行孕激素相關(guān)受體（mPRα、mPRβ、mPRγ、PR-A/B、PR-B、PG

2、RMC1和PGRMC2）的檢測及進(jìn)一步分析mPRα與肺腺癌細(xì)胞耐藥性之間的關(guān)系。
　　方法:
　　①實時熒光定量PCR(FQ-PCR)技術(shù)在mRNA水平檢測7種孕激素相關(guān)受體（mPRα、mPRβ、mPRγ、PR-A/B、PR-B、PGRMC1和PGRMC2）在4種肺腺癌細(xì)胞系（A549、A549/DDP、PC-9、PC-9/GR）中的表達(dá)情況;
　?、赪estern Blot技術(shù)在蛋白水平檢測mPRα在4種肺腺癌細(xì)胞系

3、中的表達(dá)定量;
　?、奂?xì)胞免疫熒光技術(shù)檢測mPRα在4種肺腺癌細(xì)胞系中的表達(dá)定位。
　　結(jié)果:
　　(1)以FQ-PCR技術(shù)在mRNA水平發(fā)現(xiàn)同種孕激素相關(guān)受體在4種不同肺腺癌細(xì)胞系中表達(dá)差異明顯(P＜0.05):mPRα和PGRMC2均在PC-9細(xì)胞中表達(dá)最高，mPRβ、mPRγ、PR-A/B、PR-B和PGRMC1均在A549/DDP細(xì)胞中表達(dá)最高，與此相對應(yīng)，mPRα在A549/DDP細(xì)胞中表達(dá)最低，mPRβ、P

4、R-A/B和PGRMC2均在A549細(xì)胞中表達(dá)最低，mPRγ、PR-B和PGRMC1均在PC-9/GR細(xì)胞中表達(dá)最低。
　　(2)同樣在mRNA水平，發(fā)現(xiàn)同種肺腺癌細(xì)胞內(nèi)7種不同孕激素相關(guān)受體的表達(dá)差異顯著(P＜0.01):在A549和A549/DDP細(xì)胞中均發(fā)現(xiàn)mPRγ表達(dá)最高、PR-A/B表達(dá)最低，而在PC-9和PC-9/GR細(xì)胞中均發(fā)現(xiàn)PGRMC2表達(dá)最高、PR-A/B表達(dá)最低。
　　(3)以FQ-PCR技術(shù)在mRNA

5、水平和Wester Blot技術(shù)在蛋白水平均發(fā)現(xiàn)肺腺癌耐藥細(xì)胞株(A549/DDP、PC-9/GR)分別與母株(A549、PC-9)相比其mPRα表達(dá)均有下降。
　　(4)細(xì)胞免疫熒光顯示4種肺腺癌細(xì)胞在形態(tài)學(xué)上均可見明顯的mPRα表達(dá)，且高倍鏡下顯示其表達(dá)定位于細(xì)胞膜。
　　結(jié)論:
　　①7種孕激素相關(guān)受體（mPRα、mPRβ、mPRγ、PR-A/B、PR-B、PGRMC1和PGRMC2）在4種肺腺癌細(xì)胞系(A549