PTEN Ki-67 Bax蛋白與卵巢腫瘤關系的研究.pdf

1、研究背景：卵巢癌是女性生殖器三大惡性腫瘤之一，與其他惡性腫瘤一樣，它的發(fā)生、發(fā)展也是一個多步驟、多階段且有序的過程。如今隨著分子生物學的發(fā)展，對癌基因、抑癌基因及其產物的檢測在腫瘤發(fā)病機制、惡性程度、轉移能力以及病理診斷和估計預后等方面顯示了重要作用。PTEN(又稱MMAC1或TEP1)是近年來發(fā)現的新的抑癌基因，定位于染色體10q23上，它與多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、侵襲、轉移有關，但其在卵巢腫瘤中研究報道不多，結果不一，成為近年來卵巢腫

2、瘤研究的熱點之一。Ki-67(細胞核相關抗原)是一種重要的反映腫瘤增殖活性的蛋白，對研究腫瘤的生物學行為、判斷其危害性具有重要意義，而且在許多腫瘤中都有望成為診斷和預測疾病預后的輔助工具。Bax是與Bcl-2相關X蛋白，它可以預測在接受凋亡刺激后細胞凋亡的敏感性。1，25二羥維生素D3是近年來研究較多的抗腫瘤藥物，具有抑制細胞增殖和誘導分化的作用，但其在卵巢癌中的作用研究報道不多。 目的：(1)研究抑癌基因(PTEN)、細胞增殖

3、核抗原(Ki-67)及促凋亡基因(Bax)在卵巢漿液性腫瘤組織中的表達情況及其與卵巢漿液性囊腺癌臨床病理特征的關系。(2)探討1，25-二羥維生素D3(1，25(OH)2D3)單獨及其與順鉑合用對人卵巢漿液性囊腺癌細胞株(HO-8910)生長及凋亡的影響，并測定二者作用下細胞周期分布、凋亡情況、PTEN、Ki-67、Bax蛋白表達情況，進一步探討它們的作用機制。 方法：(1)用免疫組織化學方法測定卵巢漿液性囊腺癌、交界性漿液性囊

4、腺瘤、漿液性囊腺瘤中PTEN、Ki-67及Bax蛋白表達情況。(2)用細胞培養(yǎng)技術及四唑鹽(MTT)比色法測定不同濃度1，25(OH)2D3單獨及其與順鉑合用對HO-8910細胞的生長抑制作用。(3)用流式細胞儀測定、分析1，25(OH)2D3單獨及其與順鉑合用對該細胞株細胞周期及凋亡的影響。(4)用免疫細胞化學技術檢測1，25(OH)2D3單獨及其順鉑合用后PTEN、Ki-67及Bax蛋白表達情況。 結果：(1)PTEN在卵巢

5、漿液性囊腺癌中的表達顯著低于交界性漿液性囊腺瘤、漿液性囊腺瘤(P＜0.05)，在卵巢漿液性囊腺癌中PTEN的表達在高中分化組明顯高于低分化組(P＜0.05)；臨床Ⅰ/Ⅱ期組明顯高于Ⅲ/Ⅳ期組(P＜0.05)。而Ki-67在以上各組中的表達恰好與PTEN相反；且兩者的表達均與年齡無關(P＞0.05)，在卵巢漿液性囊腺癌中PTEN與Ki-67的表達呈負相關(P＜0.05)。Bax在卵巢漿液性囊腺癌中的表達高于交界性囊腺瘤、囊腺瘤，但差異無統(tǒng)

6、計學意義(P＞0.05)，在卵巢漿液性囊腺癌中Bax的表達與臨床分期、年齡均無關(P＞0.05)，但其在高中分化組明顯高于低分化組(P＜0.05)。(2)MTT比色法結果顯示：10-7mol/L，的1，25(OH)2D3能有效抑制HO-8910細胞的生長(P＜0.01)；1，25(OH)2D3與順鉑合用有協(xié)同抑制作用(P＜0．01)；(3)流式細胞儀進行細胞周期及凋亡分析顯示：與對照組相比，1，25(OH)2D3、順鉑單獨作用于該細胞4

7、8h后G0/G1期細胞增多，凋亡率增高，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)；二者合用G0/G1期細胞增多、凋亡率增高更加明顯(P＜0.01)。(4)免疫細胞化學染色檢測顯示：單用1，25(OH)2D3、DDP作用該細胞48h后Ki-67表達下降，Bax、PTEN表達增高，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)；二者合用時Ki-67幾乎不表達，而Bax、PTEN表達增高更明顯(P＜0．01)。 結論：(1)PTEN在卵巢漿液性囊腺癌中

8、表達降低，與卵巢漿液性囊腺癌的組織學分級呈正相關，與臨床病理分期呈負相關；Ki-67表達與PTEN相反；在卵巢漿液性囊腺癌中PTEN與Ki-67的表達呈負相關。Bax的表達與卵巢漿液性腫瘤的良惡性、臨床分期均無關；但與組織學分級呈正相關。PTEN、Ki-67及Bax蛋白的表達異?？赡芘c卵巢漿液性囊腺癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關。(2)1，25(OH)2D3和順鉑對人卵巢癌細胞株HO-8910均有抑制作用，1，25(OH)2D3能增強順鉑的抑制