絕經(jīng)后不同時期長期激素替代治療對OVX大鼠認(rèn)知功能的影響.pdf

1、腦是雌激素作用的重要靶器官，它不僅對腦內(nèi)生殖相關(guān)區(qū)域有調(diào)節(jié)作用，而且對與認(rèn)知功能有關(guān)的區(qū)域如大腦皮質(zhì)、海馬等亦有調(diào)節(jié)作用。大量基礎(chǔ)研究表明當(dāng)絕經(jīng)時雌激素水平下降，不但會引起神經(jīng)遞質(zhì)的合成、分泌及其受體功能受損，突觸的數(shù)量和連接減少，還直接影響神經(jīng)元的功能和生長。 絕經(jīng)婦女應(yīng)用激素替代治療(HRT)已有半個多世紀(jì)，有關(guān)HRT的利弊之爭卻從來沒有停止過。為預(yù)防或治療老年退化性認(rèn)知功能減退的發(fā)生，人們做了很多臨床和基礎(chǔ)研究以探討外源性

2、雌激素對腦的結(jié)構(gòu)和功能的影響，但結(jié)論不盡相同。有學(xué)者認(rèn)為，這種分歧可能與HRT開始的時間差異有關(guān)，即HRT只有在圍絕經(jīng)期或絕經(jīng)早期應(yīng)用，并保持一定的雌激素水平才會對認(rèn)知功能起到保護(hù)作用，而在絕經(jīng)一段時間后神經(jīng)系統(tǒng)的功能下降達(dá)一定水平，HRT的作用就會減弱或消失。為確定是否絕經(jīng)早期開始HRT更好、受益更大、風(fēng)險更小，以及絕經(jīng)早期應(yīng)用HRT是否對絕經(jīng)晚期老年退化性認(rèn)知功能減退的發(fā)生有預(yù)防作用，我們設(shè)計了此動物實驗來探討絕經(jīng)后不同時期長期應(yīng)用

3、HRT對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的作用，為臨床研究提供補充證據(jù)。 目的： 探討去勢后不同時期大鼠長期應(yīng)用不同劑量雌、孕激素連續(xù)聯(lián)合治療(E+PT)后的行為學(xué)改變和大腦皮層及海馬各種神經(jīng)元及各種神經(jīng)遞質(zhì)及受體的功能，以及神經(jīng)形態(tài)學(xué)變化，從而對絕經(jīng)后不同時期應(yīng)用HRT在認(rèn)知功能影響的利弊分析提供證據(jù)。 方法： 選擇9-10月齡健康雌性SD大鼠，行雙側(cè)卵巢切除術(shù)(OVX)建立絕經(jīng)模型。分別在絕經(jīng)早期(OVX后三天)和晚期(

4、OVX后4個月)給予低劑量CEE+MPA、高劑量CEE+MPA或安慰劑口服給藥3個月(低量CEE0.07mg／kg／日，高量CEE為0.5mg／kg／日，均合用MPA 0.2mg／kg／日，生理鹽水為安慰劑)。以Morris水迷宮觀察大鼠空間認(rèn)知能力變化，神經(jīng)生化學(xué)測定皮層及海馬相關(guān)酶類和受體活性(ChAT，MAO，NMDA-R和M-R)，并行額葉皮層及海馬神經(jīng)元計數(shù)，觀察nNOS，BAPP的表達(dá)及分布，同時以透射電鏡觀察皮層及海馬的超

5、微結(jié)構(gòu)變化和突觸數(shù)量改變。 結(jié)果： 1．OVX大鼠模型：OVX術(shù)后出現(xiàn)了動情周期消失、體重增長等典型變化，絕經(jīng)早期應(yīng)用HRT可以逆轉(zhuǎn)體重的增加，晚期HRT影響不明顯。 2．年齡和絕經(jīng)對OVX大鼠各項指標(biāo)的影響早期對照組在行為學(xué)上，只有記憶得分明顯高于晚期對照組，其他指標(biāo)與晚期對照組相似(P>0.05)。并且早期對照組皮層和海馬ChAT酶活性、MAO活性、nNOS表達(dá)、神經(jīng)元計數(shù)及pAPP表達(dá)均與晚期對照組差異顯著

6、(P<0.05)。而海馬NMDA-R含量在早晚期對照組問沒有差異(P>0.05)。 3．絕經(jīng)后開始HRT的早晚對OVX大鼠各項指標(biāo)的影響絕經(jīng)早期，水迷宮結(jié)果中HRT組潛伏期、行程、記憶得分和正確認(rèn)知策略使用率均明顯優(yōu)于安慰劑組(P<0.05)。HRT還明顯提高皮層和海馬NMDA-R的含量、nNOS的表達(dá)和突觸數(shù)量，降低pAPP的表達(dá)，下調(diào)海馬MAO活性，并增加海馬ChAT酶活性及神經(jīng)元計數(shù)，與同期安慰劑組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(

7、P<0.05)，不同劑量HRT組間比較差異均沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。低HRT可明顯提高皮層ChAT酶活性和神經(jīng)元計數(shù)(P<0.05)，而高HRT的作用不明顯，兩者之間沒有顯著差異(P>0.05)。 絕經(jīng)晚期，除高劑量HRT仍然可以增加海馬NMDA-R的含量和CAl區(qū)突觸計數(shù)外，其余各指標(biāo)均與安慰劑組相似，不同劑量組間比較，差異也沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。HRT的應(yīng)用對皮層MAO活性無明顯影響(P>0.05)。

8、 額葉皮層及海馬CA1區(qū)透射電鏡觀察：早期安慰劑組及晚期各組多數(shù)神經(jīng)元和毛細(xì)血管有明顯損傷表現(xiàn)，早期HRT組神經(jīng)元及毛細(xì)血管形態(tài)及結(jié)構(gòu)相對正常。 4．絕經(jīng)的早晚和HRT的應(yīng)用劑量兩個因素對各項認(rèn)知功能指標(biāo)的析因分析的結(jié)果 單因素HRT應(yīng)用劑量(水、低、高)對所有指標(biāo)均無影響。單因素OVX的早晚作用的指標(biāo)有：海馬的ChAT、MAO活性和神經(jīng)元計數(shù)，皮層的NMDA-R含量、nNOS和APP的表達(dá)，均為早期組的保護(hù)作用優(yōu)于晚

9、期組。兩者之間存在交互作用的指標(biāo)有：除游泳速度的行為學(xué)指標(biāo)，皮層的ChAT活性和海馬的NMDA-R含量、nNOS和APP的表達(dá)以及皮層和海馬的突觸計數(shù)資料。結(jié)果為早期低劑量HRT組保護(hù)作用最強或早期低劑量與高劑量HRT組結(jié)果相似。 結(jié)論： 在絕經(jīng)早期HRT的應(yīng)用可以改善OVX引起的空間學(xué)習(xí)記憶能力的下降，提高皮層及海馬ChAT活性來改善膽堿能神經(jīng)系統(tǒng)功能；增加皮層及海馬NMDA受體活性來調(diào)節(jié)興奮性神經(jīng)遞質(zhì)的功能；降低海馬

10、區(qū)MAO活性，調(diào)整胺類神經(jīng)遞質(zhì)代謝；保護(hù)神經(jīng)元細(xì)胞數(shù)量，減少神經(jīng)細(xì)胞變性；調(diào)節(jié)腦內(nèi)淀粉樣物質(zhì)代謝，抑制Aβ的表達(dá)；調(diào)節(jié)NMDA-NO信息通路；維持腦血流；增加神經(jīng)元突觸傳遞等，從而達(dá)到保護(hù)神經(jīng)，對認(rèn)知功能起到正性調(diào)節(jié)作用。到了絕經(jīng)晚期HRT的大部分保護(hù)作用減弱或消失。 中樞神經(jīng)系統(tǒng)中不同的神經(jīng)元、遞質(zhì)和受體對絕經(jīng)后激素水平下降以及長期的激素替代的反應(yīng)不同。絕經(jīng)早期和絕經(jīng)晚期在補充雌激素之前兩組治療的起點不同。治療的效果也就不同。