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1、 SM5-1是本研究所自主篩選克隆的小鼠抗人單克隆抗體,其抗原p230特異表達于人肝癌、乳腺癌和黑色素瘤細胞表面。利用單克隆抗體SM5-1對401例臨床黑色素瘤標本(250例原發(fā),151例轉(zhuǎn)移)的篩查中,p230在98%的標本中表達,而在正常組織中,除在汗腺和漿細胞表面有少量表達外,在其它正常組織中均不表達。用流式細胞儀對十余株肝癌、乳腺癌和黑色素瘤細胞株篩查結(jié)果中發(fā)現(xiàn),p230不僅表達于黑色素瘤細胞,還表達于肝癌和乳腺癌細胞,而且在
2、肝癌細胞的表達水平更高,理論上為一理想的腫瘤治療靶點?! ≡诒卷椖恐?,擬通過計算機輔助設(shè)計失去血管內(nèi)皮細胞接觸作用而保留細胞毒活性的PE分子突變體,構(gòu)建以SM5-1單鏈抗體為載體而以高效低毒PE突變體為彈頭的新型免疫毒素,通過體內(nèi)外實驗考察免疫毒素的生物學(xué)功能?! 〉谝徊糠痔烊恍兔庖叨舅豐M5-1-PE38KDEL基因克隆及表達載體的構(gòu)建?! 〉诙糠置庖叨舅豐M5-1-PE38KDEL突變體的設(shè)計及表達載體的構(gòu)建。 第三部分
3、免疫毒素SM5-1-PE38KDEL及其突變體的表達與純化?! 〉谒牟糠置庖叨舅豐M5-1-PE38KDEL及其突變體的體外活性的檢測。首 第五部分免疫毒素SM5-1-PE38KDEL及其突變體的體內(nèi)毒性及抗腫瘤作用研究?! 〉诹糠置庖叨舅豰ut1的抗腫瘤機理探討?! ”疚某晒?gòu)建了免疫毒素SM5-1-PE38KDEL及其8個突變體。通過體外和體內(nèi)實驗,得到一個高效、低毒的免疫毒素突變體1,能夠明顯地預(yù)防腫瘤的發(fā)生和使腫瘤消
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