骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療實(shí)驗(yàn)性變態(tài)反應(yīng)性腦脊髓炎大鼠的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、全文分為二部分： 第一部分 尾靜脈注射人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療實(shí)驗(yàn)性變態(tài)反應(yīng)性腦脊髓炎大鼠的實(shí)驗(yàn)研究 目的：研究尾靜脈注射人骨髓間質(zhì)干細(xì)胞(hNSCs)移植治療實(shí)驗(yàn)性變態(tài)反應(yīng)性腦脊髓炎(EAE)大鼠的療效及移植后hMSCs在EAE大鼠體內(nèi)的生長、分布、分化狀況。 材料和方法：分離和純化hMSCs。用豚鼠腦脊髓勻漿免疫Wistar大鼠制備EAE大鼠模型，分別在免疫后10d、15d、21d經(jīng)尾靜脈注射移植未分化的h

2、MSCs入大鼠體內(nèi)，通過電鏡，動(dòng)物模型神經(jīng)功能評(píng)分，病理觀察hMSCs對(duì)EAE大鼠的療效，利用免疫組化方法觀察移植后的hMSCs在EAE大鼠體內(nèi)存活、遷徙、分化的狀況。RT-PCR技術(shù)檢測(cè)大鼠脊髓內(nèi)MBP mRNA和PDGFα-R mRNA表達(dá)的變化，觀察MSCs對(duì)EAE大鼠神經(jīng)髓鞘修復(fù)的療效。 結(jié)果：免疫后10天和15天hMSCs移植組大鼠自移植后10d起其神經(jīng)功能評(píng)分顯著低于對(duì)照組(P<0.05)；在電鏡下移植組髓鞘超微結(jié)構(gòu)

3、改變明顯輕于對(duì)照組；病理上各移植組在移植后10d、30d腦內(nèi)脫髓鞘病灶數(shù)目明顯少于對(duì)照組(P<0.05)。hMSCs移植組各時(shí)間點(diǎn)大鼠腦組織切片中均可見Brdu、NsE、GFAP、CNPase染色陽性細(xì)胞，CNPase(+)的少突膠質(zhì)細(xì)胞比例隨時(shí)間的延長而逐漸增多；移植組脊髓MBPmRNA和PDGFα-R mRNA的表達(dá)隨著時(shí)間延長逐漸增強(qiáng)，且與對(duì)照組相比有顯著升高(P<0.05)。 結(jié)論：hMSCs移植能有效改善EAE動(dòng)物的神

4、經(jīng)功能評(píng)分，減少脫髓鞘病灶數(shù)目，并且在體內(nèi)微環(huán)境信號(hào)的影響下分化成神經(jīng)元、星型膠質(zhì)細(xì)胞、少突膠質(zhì)細(xì)胞。 第二部分 人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植對(duì)實(shí)驗(yàn)性變態(tài)反應(yīng)性腦脊髓炎大鼠腦皮層神經(jīng)元凋亡的治療作用 目的：研究人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(hNSCs)移植前后實(shí)驗(yàn)性變態(tài)反應(yīng)性腦脊髓炎(EAE)大鼠腦皮層神經(jīng)元凋亡的狀況。 材料和方法：從人骨髓中分離和培養(yǎng)hMSCs。用豚鼠全脊髓勻漿免疫Wistar大鼠制備EAE大鼠模型，在免疫后

5、10天經(jīng)尾靜脈注射移植未分化的hMSCs入大鼠體內(nèi)，觀察hMSCs對(duì)EAE大鼠皮層神經(jīng)元凋亡的影響；免疫組化方法觀察移植后的hMSCs在EAE大鼠額葉皮層存活、遷徙、分化的狀況。 結(jié)果：成功培養(yǎng)出hMSCs。hMSCs移植組各時(shí)間點(diǎn)大鼠額葉皮層組織切片中均可見Brdu、NsE染色陽性細(xì)胞；hNSCs移植組大鼠皮層神經(jīng)元凋亡減少(P<0.05)；移植后10d、30d腦內(nèi)Brdu、NSE染色陽性細(xì)胞明顯多于移植后2d(P<0.05)