慢性乙肝病毒感染者血清IFN-γ、IL-4和IL-12的檢測及臨床意義.pdf

1、目的：乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus，HBV)感染己成為一個全球性健康問題。世界人口的1/3都曾被HBV感染。全球3.5億慢性HBV感染者中1.7億在我國，其中大約20％要死于肝硬化或肝癌。HBV對人類的生命健康構成了嚴重威脅。HBV是HBV相關疾病的始動因素，只有積極抗病毒治療才能明顯改善預后。但目前尚無理想抗HBV藥物?；謴徒】档谋桓腥菊呓^大多數(shù)是憑借自身免疫功能清除了體內的HBV。而慢性HBV感染者未能通過自身免

2、疫功能清除HBV，需要接受抗病毒治療。但并非每位患者都適于抗病毒治療，免疫功能差的患者往往收不到好的抗病毒療效?？梢姕蚀_評價慢性HBV感染者的免疫功能是非常重要的。臨床上一般以谷丙轉氨酶(ALT)作為評價機體免疫功能的間接指標。但隨著研究的深入有學者發(fā)現(xiàn)：細胞毒性T細胞(CTL)可以在不損壞肝細胞的情況下清除胞內HBV，該機制可能在清除胞內病毒過程中起著重要作用。這樣一來，ALT是否能作為評價機體免疫功能的間接指標值得進一步探討。拉米夫

3、定等核苷類藥物只能抑制HBV DNA的復制而徹底清除HBV還要靠免疫系統(tǒng)。所以免疫調節(jié)治療可能是一種有效的抗病毒療法。但在臨床上干擾素(interferon，IFN)等有免疫調節(jié)作用的抗病毒藥物并沒有收到理想效果，原因何在?wieland等發(fā)現(xiàn)內生性IFN較外源性IFN的抗病毒效果明顯增強。激發(fā)機體產(chǎn)生內生性免疫調節(jié)因子或許是一種有效的治療方法。本研究檢測IFN-γ、IL-4、IL-12三種免疫調節(jié)因子在慢性HBV感染者血清的水平，分析

4、其與ALT、HBV DNA的相關性，以了解慢性HBV感染者的免疫功能，并探索改善乙肝抗病毒治療效果的途徑。 方法：收集2006年2月至10月就診于河北醫(yī)科大學第二醫(yī)院消化內科的慢性HBV感染者及健康志愿者共62例。作為對照組的健康志愿者10例，男性7例，女性3例，年齡20～59歲，平均36.1±14.5歲。慢性HBV感染者52例，其中慢性HBV攜帶者11例，慢性乙型肝炎(ChronicHepatitis B，CHB)患者19例，

5、乙型肝炎肝硬化患者22例，男性35例，女性17例，年齡22～68歲，平均45.3±17.6歲。取清晨空腹靜脈血，其中3ml于4℃離心，1000r/min，10min，收集血清后置于冰箱低溫-20℃保存待測；其余血樣送檢驗科進行HBV DNA及肝功能檢查。采用雙抗體夾心ELISA法，參照人IL-12、IL-4、IFN-γ雙抗體夾心ABC-ELISA法說明書，每孔加入100ul標準品或待測樣品，在OD<,432>測值并根據(jù)標準孔數(shù)值繪制標準

6、曲線，計算待測樣品中IL-12、IL-4、IFN-γ的含量。實驗數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差(X ±SD)表示，用方差分析，直線相關等統(tǒng)計方法進行統(tǒng)計學處理。 結果： 1.IL-12、IL-4、IFN-γ在對照組中的水平：IL-12平均水平為(18.10±12.68)，IL-4平均水平為(26.72±23.93)，IFN-γ平均水平為(24.83±15.46)。(單位：pg/ml) 2.IFN-γ在三個實驗組中的水平：.在

7、HBV攜帶組的IFN-γ平均水平為(46.94±18.57)，慢性乙型肝炎組為(69.15±25.57)，肝炎肝硬化組為(51.59±25.82)。三個實驗組中IFN-Y的水平都高于正常對照組，結果均有顯著性差異(p<0.05)。(單位：pg/ml) 3.IL-4在三個實驗組中的水平：HBV攜帶組平均水平為(101.55±49.63)，慢性乙型肝炎組平均水平為(92.52±28.99)，肝炎肝硬化組平均水平為(97.79±39

8、.44)。三個實驗組中IL-4的水平都高于正常對照組，結果有顯著性差異(p<0.05)。(單位：pg/ml) 4.IL-12在三個實驗組中的水平：HBV攜帶組平均水平為(36.82±24.35)，慢性乙型肝炎組平均水平為(52.03±22.54)，肝炎肝硬化組平均水平為(41.23±22.10)。三個實驗組中IL-12的水平都高于正常對照組；除HBV攜帶組外結果均有顯著性差異(p<0.05)。(單位：pg/ml) 5.各

9、組IFN-γ/IL-4水平：對照組中均值為(1.14±0.39)，HBV攜帶組(0.52±0.21)，慢性乙型肝炎組(0.77±0.28)，肝硬化組(0.55±0.20)。對照組高于其它三組，結果有顯著性差異(p<0.05)。 6.慢性HBV感染者不同分組間IFN-γ/IL-4的比較：攜帶組及肝硬化組均值都小于慢性乙型肝炎組，結果有顯著性差異(p<0.05)；但HBV攜帶組和肝硬化組之間無統(tǒng)計學差異(p>0.05)。 7

10、.HBV攜帶組HBV DNA、IFN-γ和ALT三者之間相關性分析：HBV DNA與IFN-γ呈負相關(r-0.744，p<0.05)，HBV DNA與ALT無相關性(r=0.281，p>0.05)，IFN-γ與ALT之間亦無相關性(r=0.092，p>0.05)。 8.慢性乙型肝炎組HBV DNA、IFN-γ和ALT三者之間相關性分析：IFN-γ與HBV DNA呈負相關(r=0.769，p(0.05)：IFN-γ與ALT之間成

11、正相關(r=0.724，p(0.05)；ALT與HBVDNA呈負相關(r=0.705，p(0.05)。 9.慢性HBV感染者IL-12與IFN-γ及HBV DNA相關性分析：IL-12與IFN-γ呈正相關(r=0.892，p；0.05)，IL-12與HBVDNA呈負相關(r=0.361，p(0.05)。 結論： 1.慢性HBV感染者IL-4和IFN-γ的水平都較正常對照組升高，IFN-γ/IL-4值卻較對照組降低。推測I

12、FN-γ和IL-4兩個免疫調節(jié)因子比例的失調可能是慢性HBV感染者不能清除乙肝病毒的一個原因。 2.慢性HBV感染者中慢性乙型肝炎組的IFN-γ/IL-4值高于HBV攜帶組和肝炎肝硬化組。推測慢性乙型肝炎組免疫功能可能好于HBV攜帶組和肝炎肝硬化組。 3.在慢性HBV攜帶組，血清IFN-γ水平較對照組升高，TFN-γ與HBV DNA呈負相關關系。推測非細胞溶解機制可能抑制了HBV的復制，IFN-γ可能較ALT更適于評價該