pEGFPN1-dnEGFR在裸鼠模型中對胃癌細胞淋巴結轉移的抑制作用及其機制研究.pdf

1、目的：研究pEGFPN1-dnEGFR轉染胃癌細胞后形成的穩(wěn)定轉染細胞株與普通胃癌細胞相比，其在裸鼠模型中對胃癌細胞成瘤能力及淋巴結轉移能力的影響及其作用機制。
　　方法：用目的質粒pEGFPN1-dnEGFR，空質粒載體pEGFP-N1分別轉染胃癌細胞NCI-N87。用G418篩選出穩(wěn)定表達轉染質粒的細胞株，然后將實驗分為3組：NCI-N87細胞未轉染組（untreatedNCI-N87，UN組）；NCI-N87細胞pEGFP-

2、N1轉染組（EN組）；NCI-N87細胞pEGFPN1-dnEGFR轉染組（DN組）。將3組細胞種植于裸鼠右爪墊（每組6只裸鼠），6周后測其爪墊原位瘤大小及右腹股溝轉移淋巴結數(shù)目，HE染色求證其是否來源于種植胃癌細胞，免疫組織化學技術檢測組織中Akt1、MAPK3蛋白的表達，并用Westernblot、Real-timePCR檢測3組細胞Akt1mRNA、MAPK3mRNA和Akt1蛋白、MAPK3蛋白表達量多少，比較其差異。
　

3、　結果：測量得出UN、EN、DN組原位瘤的大小分別是1.61±0.21cm3、1.45±0.27cm3、0.46±0.04cm3，與UN、EN組相比，DN組種植瘤的平均體積分別下降71.4％、68.3%，DN組裸鼠的足墊處原位瘤明顯小于UN和EN組（P<0.05）。UN、EN、DN組右腹股溝淋巴結轉移數(shù)目分別是6、6、0，統(tǒng)計計算得出DN組淋巴結轉移數(shù)目明顯少于UN、EN組的結論（P<0.05）。
　　結論：pEGFPN1-dnE