pEGFPN1-dnEGFR在裸鼠模型中對胃癌細(xì)胞淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的抑制作用及其機(jī)制研究.pdf

1、目的：研究pEGFPN1-dnEGFR轉(zhuǎn)染胃癌細(xì)胞后形成的穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株與普通胃癌細(xì)胞相比，其在裸鼠模型中對胃癌細(xì)胞成瘤能力及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移能力的影響及其作用機(jī)制。
　　方法：用目的質(zhì)粒pEGFPN1-dnEGFR，空質(zhì)粒載體pEGFP-N1分別轉(zhuǎn)染胃癌細(xì)胞NCI-N87。用G418篩選出穩(wěn)定表達(dá)轉(zhuǎn)染質(zhì)粒的細(xì)胞株，然后將實(shí)驗(yàn)分為3組：NCI-N87細(xì)胞未轉(zhuǎn)染組（untreatedNCI-N87，UN組）；NCI-N87細(xì)胞pEGFP-

2、N1轉(zhuǎn)染組（EN組）；NCI-N87細(xì)胞pEGFPN1-dnEGFR轉(zhuǎn)染組（DN組）。將3組細(xì)胞種植于裸鼠右爪墊（每組6只裸鼠），6周后測其爪墊原位瘤大小及右腹股溝轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)數(shù)目，HE染色求證其是否來源于種植胃癌細(xì)胞，免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測組織中Akt1、MAPK3蛋白的表達(dá)，并用Westernblot、Real-timePCR檢測3組細(xì)胞Akt1mRNA、MAPK3mRNA和Akt1蛋白、MAPK3蛋白表達(dá)量多少，比較其差異。
　

3、　結(jié)果：測量得出UN、EN、DN組原位瘤的大小分別是1.61±0.21cm3、1.45±0.27cm3、0.46±0.04cm3，與UN、EN組相比，DN組種植瘤的平均體積分別下降71.4％、68.3%，DN組裸鼠的足墊處原位瘤明顯小于UN和EN組（P<0.05）。UN、EN、DN組右腹股溝淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)目分別是6、6、0，統(tǒng)計(jì)計(jì)算得出DN組淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)目明顯少于UN、EN組的結(jié)論（P<0.05）。
　　結(jié)論：pEGFPN1-dnE