應(yīng)用AFLP技術(shù)篩選與紅花品質(zhì)相關(guān)的分子標(biāo)記.pdf

1、中藥材的質(zhì)量(品質(zhì)性狀)與其所含活性成分的含量密切相關(guān)。紅花(FlosCarthami)是傳統(tǒng)的活血化瘀中藥，紅花中的查爾酮成分—羥基黃色素A是主要活性成分，其含量的高低，直接影響紅花品質(zhì)的優(yōu)劣。因此，高羥基黃色素A含量是篩選紅花優(yōu)良品種的重要依據(jù)。 本研究采用HPLC法，對紅花親本及雜交F2代植株的品質(zhì)進(jìn)行綜合分析，結(jié)果表明，F(xiàn)2代各植株含量呈連續(xù)性變異，紅花品質(zhì)性狀為主多效基因控制的數(shù)量性狀。采用分群分類策略(BSA)，以F

2、2代個體高、低羥基黃色素A含量的極端值為依據(jù)，構(gòu)建了品質(zhì)性狀的兩個近等基因池。在64對引物中篩選出條帶多且清晰的適合紅花AFLP的48對引物組合，并通過反復(fù)的基因池篩選出具有多態(tài)性的兩條引物，分別為EcoRI-ACT-MseI-CAG、EcoRI-ACC-MseI-CTC。經(jīng)過基因池、親本及F2代單株的共同驗證，最終獲得4條與紅花高品質(zhì)性狀(高羥基黃色素A含量)緊密連鎖的特異性DNA片斷，分別命名為AFLP-5、AFLP-7、AFLP-