基于Her2抗體和溫度雙靶向納米免疫膠束的胃癌化療研究.pdf

1、癌癥是嚴(yán)重威脅人類健康的第二大疾病，死亡率高。胃癌傳統(tǒng)的治療方法如化療、放療和手術(shù)療法等曾給腫瘤患者帶來福音，但由于腫瘤的傳統(tǒng)治療方法以殺死或抑制腫瘤細(xì)胞為主，給患者帶來極大的痛苦及毒副作用。而且，由于腫瘤細(xì)胞具有高度的隱秘性，手術(shù)治療往往難以徹底清除腫瘤細(xì)胞，具有高復(fù)發(fā)性;而化療和放療雖然對(duì)癌細(xì)胞具有較大的殺傷效果，但抗腫瘤藥物普遍缺乏選擇性，其具有較高的療效-劑量依賴關(guān)系，即加大藥物劑量能明顯提高療效，而藥物劑量的增加勢(shì)必加重全身的

2、毒副反應(yīng)，使化療藥物的臨床治療效果不佳，應(yīng)用受到限制;另一個(gè)問題是腫瘤細(xì)胞抗藥性的快速出現(xiàn)，導(dǎo)致藥物的有效性迅速降低。因此尋找新的有效的提高化療藥物利用度、降低毒副作用及低耐藥性的治療方法是臨床抗腫瘤化療亟待解決的問題。
　　 隨著納米技術(shù)和材料的發(fā)展，基于納米技術(shù)的抗腫瘤納米醫(yī)藥為解決上述化療中的問題提供了新的思路，為腫瘤的治療帶來了新的方法，給腫瘤患者帶來了新的福音。近年來，隨著納米醫(yī)藥的發(fā)展，出現(xiàn)了多種新型以提高藥物和基因

3、轉(zhuǎn)移效率的納米載藥體系，如脂質(zhì)體、病毒載體等。這些新型的納米載藥體系有效地改善了化療效果，如化療藥物在體內(nèi)穩(wěn)定性差，循環(huán)時(shí)間短，腫瘤內(nèi)富集不足等方面得到了改進(jìn)，但其發(fā)展仍然不完善，仍受到體內(nèi)外很多因素的限制，如其與腫瘤細(xì)胞結(jié)合作用不強(qiáng)、胞吞少;胞內(nèi)特定部位藥物釋放不可控。因此，發(fā)展具有特異性靶向功能的智能納米載體迫在眉睫。
　　 高分子膠束載體的出現(xiàn)為實(shí)現(xiàn)特異性靶向提供了可能。高分子膠束是指利用兩親性高分子在溶液中自主裝的過程，

4、形成具有規(guī)整核殼結(jié)構(gòu)的納米高分子載體。高分子膠束載體具有以下特點(diǎn):體內(nèi)穩(wěn)定，無免疫原性，可多次反復(fù)注射;無遺傳毒性和細(xì)胞毒性;可以實(shí)現(xiàn)藥物或基因的可控釋放，有效延長作用時(shí)間，提高血藥濃度，維持藥物濃度，提高轉(zhuǎn)染效率和生物利用度;可以避免藥物在體內(nèi)的降解和變性，提高藥物的體內(nèi)穩(wěn)定性。同時(shí)，在所有的納米材料載體體系中，高分子膠束作為納米載藥體系，有其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，如在熱力學(xué)和動(dòng)力學(xué)上，具有很好的穩(wěn)定性;載藥范圍廣;體內(nèi)滯留時(shí)間長;還可以在其表

5、面連接具有特異性識(shí)別功能的靶向分子，實(shí)現(xiàn)主動(dòng)靶向。這些優(yōu)點(diǎn)使得高分子膠束載體在腫瘤的治療方面體現(xiàn)出強(qiáng)大的潛力。
　　 因此，在本論文工作中，我們首先針對(duì)上述臨床抗腫瘤化療中的問題，設(shè)計(jì)并合成了偶聯(lián)有抗Her2抗體Fab片段的溫度敏感型納米免疫膠束poly(N-isopropylacrylamide-co-N,N-dimethylacrylamide)118-poly(lactide)71(PID118-b-PLA71)。該納米免

6、疫膠束的聚N-異丙基丙烯酰胺共聚物的外殼具有溫敏特性，其相轉(zhuǎn)變溫度為39度，具有被動(dòng)靶向的功能;而偶聯(lián)的抗Her2抗體Fab片段，則能夠提供主動(dòng)靶向的功能，這種免疫膠束顯示出獨(dú)特的雙靶向功能。在沒有改變免疫膠束結(jié)構(gòu)的情況下，我們通過增強(qiáng)其內(nèi)核的疏水性成功的使其載藥量提高了近2倍。在溫度調(diào)控的被動(dòng)靶向和抗體調(diào)控的主動(dòng)靶向的雙靶向引導(dǎo)的情況下，藥物被細(xì)胞內(nèi)吞并富集的含量是單純藥物在相同條件下的約4倍。在溫度高于載體體系相轉(zhuǎn)變溫度的條件下，細(xì)

7、胞毒性實(shí)驗(yàn)表明我們的雙功能靶向免疫膠束殺傷高表達(dá)Her2分子的胃癌細(xì)胞（N87細(xì)胞），其IC50值比單純的鹽酸阿霉素制劑的IC50值低了約9倍。體外穩(wěn)定性試驗(yàn)表明，通過增加聚N-異丙基丙烯酰胺共聚物的鏈密度可以增強(qiáng)免疫膠束在血清中的穩(wěn)定性。我們?cè)u(píng)價(jià)了免疫膠束在荷瘤小鼠（Balb/c裸鼠）體內(nèi)的分布。通過小動(dòng)物活體成像儀IVIS成像系統(tǒng)的觀察，我們發(fā)現(xiàn)這種免疫膠束在通過尾靜脈注射進(jìn)入小鼠體內(nèi)24小時(shí)后，可以明顯富集到小鼠的實(shí)體瘤部位。正是

8、由于免疫膠束具有高度的血清穩(wěn)定性和雙靶向功能，使得異種移植的胃癌實(shí)體瘤的生長得到明顯的抑制。免疫膠束治療組小鼠的腫瘤體積，其增長速度要比對(duì)照組小了近3倍。
　　 通過本課題的系統(tǒng)研究，我們很高興的發(fā)現(xiàn):這種具有抗Her2抗體主動(dòng)靶向和溫度調(diào)控的被動(dòng)靶向的雙靶向功能的免疫膠束在腫瘤的化學(xué)治療中顯示出強(qiáng)大的應(yīng)用潛力，對(duì)在降低化療藥物的毒副作用、提高其對(duì)腫瘤的殺傷、減輕病人痛苦方面具有很好的效果。我們希望本研究對(duì)臨床抗腫瘤化療及設(shè)計(jì)構(gòu)