大鼠精子發(fā)生相關(guān)蛋白的研究.pdf

1、　　本實驗中，用牛血清白蛋白梯度沉降(STAPUT)法分離出大鼠睪丸處于減數(shù)分裂前、中、后期的3種生精細(xì)胞，即A型精原細(xì)胞、粗線期精母細(xì)胞和圓形精子細(xì)胞。A型精原細(xì)胞的總蛋白代表減數(shù)分裂前期所表達(dá)的蛋白，粗線期精母細(xì)胞的總蛋白代表減數(shù)分裂中期所表達(dá)的蛋白，圓形精子細(xì)胞的總蛋白代表減數(shù)分裂后期所表達(dá)的蛋白。　　分別提取這3種細(xì)胞的總蛋白，進行雙向電泳。對A型精原細(xì)胞、粗線期精母細(xì)胞、圓形精子細(xì)胞總蛋白表達(dá)譜的差別進行分析，尋找與精子減數(shù)

2、分裂有關(guān)的蛋白質(zhì)。本實驗中，圓形精子細(xì)胞雙向電泳凝膠中共檢到341個蛋白質(zhì)點，A型精原細(xì)胞凝膠中有424個蛋白質(zhì)點，粗線期精母細(xì)胞凝膠中有551個蛋白質(zhì)點，3種細(xì)胞蛋白表達(dá)具有較大差異?！　√暨x了4個表達(dá)量大，差異明顯，肉眼即能看出差別的蛋白質(zhì)點做飛行質(zhì)譜分析，了解差異蛋白身份。對質(zhì)譜檢測所得肽質(zhì)量指紋圖數(shù)據(jù)，檢索互聯(lián)網(wǎng)上的蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫，發(fā)現(xiàn)4個蛋白質(zhì)點分別是：熱休克蛋白70-2(Hsp70-2)、磷脂酰乙醇胺結(jié)合蛋白(RKIP)、β