四種真菌多糖及其配方的體外抗氧化研究.pdf

1、多糖(polysaccharide)是由10個以上的單糖通過糖苷鍵連接形成的含酮基或醛基的多羥基聚合物及其衍生物,它廣泛分布于自然界,尤其存在于植物及微生物的細胞壁中。近年來隨著人們對多糖類化合物的分離、純化、結構分析和組分測定手段的進一步提高,對多糖類化合物的生物學功能有了新的認識,如多糖在細胞識別、細胞間物質運輸、免疫調節(jié)及抗腫瘤等方面作用的研究引起了人們的廣泛重視,其中從食用真菌中提取出的多糖,更表現(xiàn)出免疫調節(jié)和抗腫瘤的重要作用,

2、從而為尋找抗腫瘤藥物展示了良好的前景。隨著人類生存環(huán)境的改變,營養(yǎng)模式的改變,醫(yī)學模式和世界疾病譜的改變,單純化學藥物已經(jīng)不能適應人們防病治病的需要,返璞歸真,回歸自然,崇尚天然藥物和天然復合營養(yǎng)已成當代潮流,食物和天然藥物的組合要素,一定是以一種嚴謹?shù)膹头交驈秃系臓顟B(tài)存在。
　　它們在自然界并非單獨的個體,是有機的群體,這些分子彼此間交織成一個復雜的立體結構,鑲嵌于復雜構造上的物質,包括蛋白質、維生素、礦物質等甚至成千上萬種復雜

3、的組合。它們應付千變萬化的要求抗御“百病”和體現(xiàn)神奇的功能。甚至到目前生物科學還無法完全描述和明白它。如真菌中不僅有完整的、高含量和高質量的普通營養(yǎng)素,更重要的是有許多化學結構穩(wěn)定、功能卓著的生理活性物質。這些活性物質結構復雜,種類繁多,功效不一,單β-多聚糖就有上百種,三萜類也上及百種,還有生物堿、腺苷類、維生素等。這些成份組成一個天然的“君臣佐使”之優(yōu)型組合,起到了防治各種疾病的作用。
　　食用菌多糖大多具有特殊活性,不同食用

4、菌多糖其結構也不相同,對人體有不同的治療和調理作用。這些多糖有很強的可嫁接活性,根據(jù)“君臣佐使”藥理進行仿生態(tài)嫁接而成的多糖基因,具有更全面的辨證施治功效,即對癥又對病,由表及里,對疾病進行全方位調理,直到康復。據(jù)文獻報道:許多多糖單用雖有一定抗腫瘤效果,但兩種免疫增強劑包括兩種多糖合用療效會更好,從理論上講具有協(xié)同作用,其免疫增強及抗腫瘤作用會明顯提高。復合多糖療效之所以優(yōu)于單味多糖,主要在于通過配伍發(fā)揮了藥物間的相輔相成作用,可明顯

5、提高療效。目前,有關復合多糖的協(xié)同作用研究已經(jīng)引起學者們的興趣。復合多糖的作用并非是單味多糖成分的簡單相加,各成分間存在著相輔相成、相互為用的關系,其相加、協(xié)同或拮抗作用不容忽視。由于多糖經(jīng)復合后會產生協(xié)同、相加或拮抗的相互作用而導致療效提高或者降低,采用何種方式進行組合配伍在研制復合多糖中起著決定性的作用,這方面探索不僅是必要的,也是非常有價值的。
　　因此本研究采用分離純化的多糖,對體外氧自由基、羥自由基的清除為依據(jù)來驗證多糖

6、配伍復合原則的合理性與可行性,為應用于其它疾病治療的復合多糖開發(fā)提供依據(jù)。
　　目的：本研究以體外抗氧化作用為依據(jù),以功效及結構的相互協(xié)同互補為原則,對四種真菌多糖復合的最佳組合進行研究,為多糖應用提供復合多糖的配方。
　　方法：以桑黃、香菇、白樺茸、云芝真菌粗多糖為原料,用鄰苯三酚水楊酸法和自氧化測定對超氧陰離子自由基和羥自由基的清除率,以清除率為評判依據(jù),采用L16(45)正交設計,進行復合配方研究,并對粗多糖的紫外吸收

7、光譜及多糖含量的條件進行探討。
　　結果：1、從桑黃、香菇、白樺茸、云芝真菌多糖紫外吸收光譜顯示:最大吸收波長均在200~210nm和258~260nm,但吸收曲線的形狀不同,不同多糖在相同的波長下的紫外吸收也不同。2、通過苯酚-硫酸法定量測定的條件實驗顯示,其最佳條件為:5％苯酚溶液1.6mL,濃硫酸6.5mL,加酸后水浴溫度25℃,在1h內測量為宜;在0.0080-0.0640g/L的濃度范圍內,糖濃度與紫外吸光度(吸收光波長

8、為490nm)呈線性關系(r=0.9995);對標準品的測量值的相對平均偏差≤1.42％,對樣品測量值的標準偏差S=0.66(n=4);平均加樣回收率為98.01％,標準偏差S=2.17(n=4)。3、通過對桑黃、香菇、白樺茸、云芝真菌多糖粗提物的體外清除超氧陰離子自由基、羥自由基的測定結果顯示:桑黃、香菇、白樺茸、云芝多糖在濃度為5.0g/L時,對羥自由基的體外清除率分別為46.40％、67.63％、58.68％、53.92％;在濃度

9、為20g/L時,對羥自由基的體外清除率分別為70.18％、90.36％、93.12％、85.00％。4、通過桑黃、香菇、白樺茸、云芝真菌多糖體外抗氧化的L16(45)正交設計結果,確定了復合多糖的最佳配方為:4.66g/L桑黃多糖、6.64g/L香菇多糖、4.22g/L白樺茸多糖、8.09g/L云芝多糖組合。
　　結論：四種真菌多糖的最佳配方為:桑黃多糖4.66g/L、白樺茸多糖4.22g/L、云芝多糖8.09g/L、香菇多糖6.