維甲酸誘導(dǎo)大鼠肛門(mén)直腸畸形模型演變規(guī)律、RAR及Hox基因表達(dá)的研究.pdf

1、中國(guó)醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文維甲酸誘導(dǎo)大鼠肛門(mén)直腸畸形模型演變規(guī)律、RAR及Hox基因表達(dá)的研究姓名：郭俊斌申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專(zhuān)業(yè)：兒科學(xué)指導(dǎo)教師：王練英20050401維甲酸誘導(dǎo)大鼠肛門(mén)直腸畸形模型演變規(guī)律、RAR及Hox基因表達(dá)的研究前言先天性肛門(mén)直腸畸形(Congenitalanoreetalmalformations，ARMs)是常見(jiàn)的消化道畸形，其發(fā)生率在15005000名新生兒中一例。它包括一廣泛的疾病譜，從最輕癥的膜狀肛門(mén)到嚴(yán)

2、重的泄殖腔畸形，其病理改變非常復(fù)雜。對(duì)于它的治療，無(wú)論從急診糾正畸形還是術(shù)后遠(yuǎn)期便秘和便失蔡的治療均為臨床治療難題。目前對(duì)于正常肛門(mén)直腸的胚胎發(fā)育的演變規(guī)律和肛門(mén)直腸畸形在胚胎期發(fā)生的具體機(jī)制均不明確。維生素A類(lèi)似物作為二種必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，其代謝物參與包括視力、生殖、生長(zhǎng)、細(xì)胞分化、免疫功能以及胚胎發(fā)育等體內(nèi)的許多生理過(guò)程。飲食中維生素A缺乏或攝入過(guò)量的維生索A均可能引起臨床上一系列與維生察A代謝異常相關(guān)的病理狀態(tài)。在正常的胚胎發(fā)育過(guò)程

3、中維持恰當(dāng)?shù)木S生紊A水平是很重要的，在孕期維生素A缺乏積過(guò)多地應(yīng)用維生素A類(lèi)物均可能導(dǎo)致胚胎畸形產(chǎn)生，其中即包括肛門(mén)直腸畸形。因此利用維甲酸這一維生素A類(lèi)似物最常見(jiàn)的活性形式誘導(dǎo)產(chǎn)生肛門(mén)直腸畸形動(dòng)物模型并進(jìn)行發(fā)病機(jī)制的研究。可以彌補(bǔ)臨床標(biāo)本的不足并克服倫理學(xué)方面的束縛，從胚胎學(xué)和分子生物學(xué)方面來(lái)探討維生素A類(lèi)物與肛門(mén)宣腸畸形之聞的相關(guān)性。本實(shí)驗(yàn)包括以下幾個(gè)方面內(nèi)容：①肛門(mén)直腸畸形動(dòng)物模型的建立：在大鼠懷孕的特定時(shí)期，經(jīng)口投以一定量的維甲

4、酸，誘導(dǎo)產(chǎn)生胎鼠肛門(mén)直腸畸形動(dòng)物模型，并觀察其伴發(fā)畸形，總結(jié)其規(guī)律，來(lái)探討它們可能存在的共同的胚胎發(fā)生機(jī)制。②維甲酸誘導(dǎo)大鼠肛門(mén)直腸畸形胚胎中RARmRNA表達(dá)的研究：采用逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈反應(yīng)(1it—PCR)法檢測(cè)對(duì)照組和畸形組胚胎中尾側(cè)部分的維甲酸受體(RAR)各亞型mRIqA的表達(dá)模式，從而探討維生素A信號(hào)途徑與肛門(mén)直腸畸形發(fā)生之間的相關(guān)性與具體機(jī)制。③維甲酸誘導(dǎo)大鼠肛門(mén)直腸畸形演變規(guī)律及Hoxd一13基因表達(dá)的研究：連續(xù)觀察肛門(mén)