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1、目的:該研究旨在ABL酪氨酸激酶(Abelson,Ab1)陽(yáng)性的人白血病細(xì)胞K562的基礎(chǔ)上,建立對(duì)抗癌藥物STI571耐藥的細(xì)胞株K562/G01,作為STI571耐藥細(xì)胞的模型,研究其耐藥機(jī)制及其耐藥性的逆轉(zhuǎn)方法.方法:K562細(xì)胞長(zhǎng)期接觸STI571,誘導(dǎo)建立耐藥株;應(yīng)用MTT法、RT-PCR、Western雜交、染色體原位雜交等方法探討產(chǎn)生耐藥性的分子機(jī)制并尋找克服耐藥性的方法.結(jié)果:建立了K562/G01耐藥細(xì)胞,耐藥倍數(shù)大于
2、11倍,除了阿霉素之外,對(duì)其它化療藥物無(wú)交叉耐藥性;細(xì)胞一般形態(tài)與K562細(xì)胞無(wú)明顯差異;細(xì)胞增殖較敏感細(xì)胞活躍;bcr/abl、多藥耐藥基因mdr1及其表達(dá)產(chǎn)物P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)和BCR/ABL的表達(dá)均升高,BCR/ABL的激酶活性升高,bcr/abl融合基因擴(kuò)增,但BCR/ABL的ATP結(jié)合位點(diǎn)無(wú)突變;以BCR/ABL為靶點(diǎn),應(yīng)用計(jì)算機(jī)高通量篩選,得到兩個(gè)具有抗癌作用的先導(dǎo)化合物,它們對(duì)K562/G
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