產氣腸桿菌的耐藥性及耐藥機制研究.pdf

1、目的：在明確湛江地區(qū)產氣腸桿菌耐藥現(xiàn)狀的基礎上，闡明整合子的流行現(xiàn)狀、分布（定位）及耐藥基因盒種類，探討整合子與耐藥性的關系，為合理使用抗生素，控制耐藥菌株播散提供理論依據(jù)。
　　 方法：⑴采用全自動微生物分析儀(VITEK32)鑒定細菌。⑵抗生素敏感性試驗:采用紙片擴散法（K-B法）測定70株產氣腸桿菌對13種抗生素的敏感性;采用瓊脂稀釋法測定70株產氣腸桿菌對4種抗生素的最小抑菌濃度。⑶采用雙紙片協(xié)同法篩選ESBLs陽性菌株

2、。⑷PCR擴增產氣腸桿菌質粒和染色體上的整合子及整合子陽性株中的可變區(qū)耐藥基因，并做測序分析。
　　 結果：①湛江地區(qū)共分離出70株產氣腸桿菌，主要的標本來源為痰液、尿液和血液，分別占標本來源的54.3％、17.1％和8.6％。產氣腸桿菌對亞胺培南和美羅培南的敏感度100％，對氨芐青霉素耐藥率為100％，其他抗生素則表現(xiàn)出不同程度耐藥。ESBLs的陽性率為58.57％(41/70)，ESBLs陽性菌株耐藥率整體比陰性菌株高。②頭

3、孢唑啉、頭孢吡肟、頭孢西丁、頭孢他啶、頭孢哌酮/舒巴坦、慶大霉素在整合子陽性組中的耐藥率明顯高于整合子陰性組，耐藥率差別有統(tǒng)計學意義;頭孢噻肟、左旋氧氟沙星、丁胺卡那的耐藥率在兩組的差別則無統(tǒng)計學意義。③70株產氣腸桿菌中有15株檢測到Ⅰ類整合子，陽性率為21.4％，僅在染色體DNA中檢測到Ⅰ類整合酶的有2株，陽性率為2.9％，占陽性株的13.3％;僅在質粒DNA中檢測到Ⅰ類整合子有3株，陽性率為4.3％，占陽性株的20.0％;同時在染

4、色體DNA和質粒DNA上都檢測到Ⅰ類整合酶的有10株，陽性率為14.3％，占陽性株的66.7％。即在染色體DNA上的檢出率為17.1％(12/70)，而在質粒上的檢出率為18.8％(13/70)。未檢測出Ⅱ類整合子。④分別以Ⅰ類整合子陽性株質粒DNA和染色體DNA為模板進行PCR擴增Ⅰ類整合子可變區(qū)，分別有13株和12株陽性，攜帶大小不等的基因，其中有些陽性株含有多個基因。⑤本地區(qū)產氣腸桿菌攜帶的整合子含耐氨基糖苷類抗生素基因aadA1

5、、aadA2和aadA4,耐甲氧芐氨嘧啶抗生素基因dfrA12,耐β-內酰胺類基因blaIMP-3、blaIMP-4和耐氯霉素基因catB6、catB8。產氣腸桿菌對氨基糖苷類抗生素的耐藥率和耐藥基因攜帶率基本對應。
　　 結論：⑴產氣腸桿菌主要引起呼吸道、尿路感染，血液感染有增加的趨勢;其多重耐藥趨勢明顯，耐藥情況嚴重。⑵產氣腸桿菌Ⅰ類整合子陽性株比陰性株更容易產生耐藥，同時在質粒和染色體上攜帶Ⅰ類整合子的現(xiàn)象常見，提示耐藥基