兒童感染幽門螺桿菌對克拉霉素耐藥性及耐藥機(jī)制的研究.pdf

1、浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文兒童感染幽門螺桿菌對克拉霉素耐藥性及耐藥機(jī)制的研究姓名：余金丹申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：兒科學(xué)（消化）指導(dǎo)教師：陳潔20040501⑧浙江大學(xué)碩士研究生論文對突變類型與耐藥程度的相關(guān)性進(jìn)行相關(guān)關(guān)系分析。結(jié)果顯示分離的108株Hpylori菌株共檢出16株耐藥菌株，耐藥率為148％(16／108)，其MIC值范圍為l一128pg／ml。同時采用Etest法和瓊脂稀釋法檢測藥敏和耐藥情況，結(jié)果顯示兩種方法在藥敏范圍和耐藥性

2、檢測上有較好的一致性。PCR擴(kuò)增結(jié)果及RFLP分析：108株不同MIC的敏感菌株或耐藥菌株經(jīng)PCR均擴(kuò)增出包含23SrRNA基因V功能區(qū)的425bp片段，擴(kuò)增產(chǎn)物在瓊脂糖凝膠電泳中均顯示一條清晰條帶，位置相同。16株耐藥菌株中13株菌株的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物可被BsaI酶切成兩個片段，3株擴(kuò)增產(chǎn)物可被BbsI酶切，提示13株耐藥菌株在23SrRNA基因v功能區(qū)第2144位有A—G突變，3株耐藥菌株則在第2143位有A—G突變：所有敏感菌株的4

3、25bp擴(kuò)增產(chǎn)物均未能被BsaI和BbsI酶切。并且發(fā)現(xiàn)所有耐藥菌株均不能被完全酶切，仍存在425bp未被酶切片段。經(jīng)過Bivariate相關(guān)性分析，未發(fā)現(xiàn)突變類型與耐藥程度有明顯相關(guān)性(F0035，P005)。選擇測序的8株Hpylori菌株(2株敏感菌株和6抹耐藥菌株，其中5株被BsaI酶切，一株被BbsI酶切)23SrRNA基因PCR擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)核苷酸序列分析，證實耐藥菌株存在A2144G位(Bsal酶切)和A2143G(BbsI酶

4、切)位突變，敏感菌株則無相應(yīng)位點的突變，同時發(fā)現(xiàn)所有敏感菌株和耐藥菌株均存在2183位T—《突變。與Hpylori26695株及HpyloriJ99株比較，其核苷酸序列同源性為99％。本研究結(jié)果表示：兒童感染Hpylori菌株對克拉霉索有較高的耐藥率，23SrRNA突變是導(dǎo)致Hpylori對克拉霉索耐藥的重要原因。存在A2144G和A2143G突變，以前者為主；未發(fā)現(xiàn)A2144G突變菌株和A2143G突變菌株耐藥程度的差別。2183位1