超聲檢測肝癌血管分級與血管生成的關(guān)系及射頻消融術(shù)對兔肝VX2殘余腫瘤的研究.pdf

1、第一部分、超聲檢測肝癌血流分級與HIF-1α、MVD表達的關(guān)系
　　目的:超聲觀察肝癌血流分級及其血流情況，并探討缺氧誘導因子-1α(hypoxiainducible factor-(1)alpha，HIF-1α)與微血管密度(microvessel density，MVD)在肝癌組織中的表達及二者間關(guān)系。
　　方法:對60例經(jīng)病理證實的原發(fā)性肝癌手術(shù)切除術(shù)前進行二維及彩色多普勒超聲檢查，進行血流分級，通過免疫組織化學的方法

2、檢測HIF-1α、MVD在肝癌組織中的表達。
　　結(jié)果:肝癌超聲血流分級為Ⅰ級時HIF-1a、MVD表達率分別為（64.37±3.02）、（39.32±3.71），血流分級為Ⅱ級時HIF-1a、MVD表達率分別為（79.94±2.97）、（62.25±3.80），血流分級為Ⅲ級時HIF-1a、MVD表達率分別為（92.61±3.10）、（85.16±2.33），超聲肝癌血流等級和HIF-1α、MVD相關(guān)，在肝癌組織中當血流分級為Ⅲ

3、級時HIF-1a、MVD表達率最高，分別為92.61％±3.10、85.16％±2.33，在正常肝組織中HIF-1a、MVD表達率分別為12.28％±7.21、11.33％±7.21，二者比較具有顯著性差異（P＜0.05）。
　　結(jié)論:HIF-1a的表達與肝癌新生血管的生成密切相關(guān)，MVD高表達、HIF-1α表達越高，彩色多普勒顯示血流越豐富，肝癌超聲血流分級能夠為臨床診治肝癌、評估療效提供理論依據(jù)。
　　第二部分、IGF-

4、Ⅱ、PCNA在兔肝VX2瘤射頻消融后殘癌中表達的研究
　　目的:研究兔肝VX2瘤射頻消融治療（Radiofrequency Ablation，RFA）后殘癌中胰島素生長因子-Ⅱ（Insulin-like growth factor，IGF-Ⅱ）、增殖細胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)的表達。
　　方法:實驗兔28只，3只VX2荷瘤兔。2只作為傳代兔，余23只實驗兔行

5、超聲引導下肝內(nèi)瘤塊植入，建立VX2肝癌模型。從荷瘤兔切取腫瘤周邊生長旺盛的魚肉樣組織，隨機取2只實驗兔，于雙腿內(nèi)側(cè)局麻后，手術(shù)刀破皮，用鑷子將瘤塊送入皮下，傳代（傳代兔）。超聲引導下將VX2瘤粒分批接種于23只實驗兔肝臟內(nèi)，制成肝癌模型。將實驗兔隨機分為5組:對照組3只（A組），不行RFA治療;余下20只行超聲引導下RFA治療，射頻范圍為腫瘤最大半徑的2/3，人為造成腫瘤組織殘余。按治療后不同時間分為射頻后0h組（B組）5只;射頻后1w

6、組（C組）5只;射頻后2w組（D組）5只;射頻后4w組（E組）5只。各組經(jīng)超聲檢查后將實驗兔處死，切取標本，采用免疫組織化學法觀察A組腫瘤及B-E組殘余腫瘤組織中IGF-Ⅱ及PCNA的表達情況。
　　結(jié)果:
　　1.造模結(jié)果:接種后2-4w行超聲檢查，23只實驗兔均種植成功。超聲顯示肝臟種植區(qū)圓形或類圓形低回聲腫物，內(nèi)回聲均勻，大小1.5±0.5cm，邊界清，無包膜回聲，血流豐富。A組經(jīng)病理證實，接種成功率100％。

7、　　2.RFA術(shù)后超聲結(jié)果:術(shù)后0h腫瘤損毀區(qū)為不規(guī)則汽化強回聲，邊界不清，形態(tài)不規(guī)則，彩色多普勒(CDF)及能量多普勒(CDE):無法測到血流信號。術(shù)后1w、2w、4w腫瘤大小與術(shù)前相似，治療區(qū)呈不規(guī)則高回聲，中心區(qū)可見少量不規(guī)則無回聲;術(shù)后1w、2w CDF及CDE無明顯血流信號，術(shù)后4w CDE部分殘癌周圍可見血流信號。
　　3.HE染色結(jié)果:A組瘤體及B-E組殘癌細胞核大深染，異型性明顯，呈巢狀分布。射頻區(qū)凝固壞死，可見核

8、固縮、核碎裂、核溶解，周圍見大量紅染組織，淋巴細胞浸潤，周圍形成1-3mm炎癥反應(yīng)帶;射頻1w后開始出現(xiàn)液化，2w液化壞死范圍擴大，炎癥反應(yīng)帶纖維化。
　　4.免疫組織化學結(jié)果:A組IGF-Ⅱ、PCNA呈高表達，分別為（86.3±12.5）、(65.37±13.36);B組IGF-Ⅱ、PCNA在殘癌組織中表達陽性率為（78.9±13.3）、(50.78±13.98);C組IGF-Ⅱ、PCNA在殘癌組織中表達陽性率為（47.2±10