益氣活血法對(duì)COPD模型大鼠氣道重塑調(diào)節(jié)作用的初步研究.pdf

1、目的：依據(jù)慢性阻塞性肺病(COPD)氣道重塑的中醫(yī)發(fā)病機(jī)理之氣虛、血瘀，選擇益氣固表的代表方玉屏風(fēng)散，同時(shí)加用活血藥物三七，對(duì)COPD模型大鼠氣道重塑調(diào)節(jié)作用做初步的研究。通過(guò)觀察玉屏風(fēng)散、三七、玉屏風(fēng)散加三七對(duì)COPD模型大鼠血清中TGF-β1、MMP-9、TIMP1、VEGF相關(guān)細(xì)胞因子濃度的影響，探討益氣活血法防治COPD氣道重塑的可能作用機(jī)制，為其臨床應(yīng)用提供新的思路和防治方法。
　　 方法：⑴建立COPD大鼠模型:75

2、只清潔級(jí)雄性SD大鼠，按隨機(jī)原則分為正常對(duì)照組、COPD模型自然恢復(fù)組、玉屏風(fēng)散組、玉屏風(fēng)散加三七組、三七組，除正常對(duì)照組外，其余各組分別于實(shí)驗(yàn)第1、14天向大鼠氣管內(nèi)注入脂多糖200μL;第2～28天（第14天除外）用紅河牌香煙煙熏，30分鐘/天，共28天;正常對(duì)照組不予煙熏，但采用相同的方法氣管內(nèi)滴入等量的生理鹽水。⑵玉屏風(fēng)散、三七干預(yù)研究:對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行灌胃給藥，正常對(duì)照組和COPD模型組:給予生理鹽水灌胃（1 ml/200g體重

3、，每天），共30天;玉屏風(fēng)散組、三七組、玉屏風(fēng)散加三七組用藥按臨床等效量換算（1 ml/200g體重，每天），共30天。⑶觀察各組大鼠行為學(xué)改變;取大鼠肺組織做病理切片，行HE、VG染色觀察其病理形態(tài)學(xué)變化;采用雙抗體夾心ELISA法檢測(cè)大鼠血清中TGF-β1、MMP-9、TIMP1、VEGF濃度。
　　 結(jié)果：①造模后，COPD模型組出現(xiàn)不同程度的煩躁不安，呼吸加快，隨著造模時(shí)間的延長(zhǎng)，毛發(fā)逐漸失去光澤、神情倦怠，活動(dòng)明顯減少

4、或俯伏不動(dòng)，甚至聚集成團(tuán)，點(diǎn)頭運(yùn)動(dòng)，呼吸急促，腹肌抽搐，喘息，并且出現(xiàn)打噴嚏及口鼻分泌物增多等癥狀，正常對(duì)照組未見(jiàn)異常變化，提示造模成功。②取各組大鼠左下肺組織，行HE、VG染色可見(jiàn):模型組大鼠支氣管黏膜上皮脫落，管壁及周?chē)罅繂魏思?xì)胞和淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，杯狀細(xì)胞增多;肺泡腔顯著擴(kuò)大，肺泡壁斷裂，肺泡融合，可見(jiàn)明顯肺氣腫;成纖維細(xì)胞開(kāi)始增生，膠原纖維增多，小氣道膠原纖維增厚，平滑肌細(xì)胞增生、排列稍亂，平滑肌層增厚，管腔變窄;毛細(xì)血管增生，血

5、管腔狹窄，血管壁玻變。正常組大鼠支氣管及肺泡結(jié)構(gòu)清晰，膠原纖維增多不明顯，血管腔未見(jiàn)明顯狹窄，提示造模成功。③玉屏風(fēng)散能下調(diào)COPD模型大鼠血清中TGF-β1、VEGF水平，與模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，對(duì)MMP-9、TIMP-1玉屏風(fēng)散有下降的趨勢(shì)，但與模型組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。玉屏風(fēng)散加三七、三七能下調(diào)COPD模型大鼠血清中TGF-β1、MMP-9、TIMP-1、VEGF水平，與模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)

6、學(xué)意義(P＜0.01，P＜0.05);玉屏風(fēng)散加三七能下調(diào)COPD模型大鼠血清中VEGF水平，與玉屏風(fēng)散、三七比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　 結(jié)論：⑴通過(guò)益氣活血干預(yù)COPD氣道重塑大鼠模型，可見(jiàn)大鼠肺組織支氣管及血管周?chē)仔约?xì)胞浸潤(rùn)減少，細(xì)胞外基質(zhì)沉積及膠原纖維的增生得以降解，氣道壁、血管腔的炎癥狀態(tài)得以改善。⑵玉屏風(fēng)散加三七對(duì)COPD模型大鼠氣道重塑的作用機(jī)理之一是通過(guò)調(diào)節(jié)VEGF水平，抑制成纖維細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞