細(xì)胞電穿孔聯(lián)合低濃度順鉑對卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生長作用研究.pdf

1、本文探討細(xì)胞電穿孔(CellElectroporation)聯(lián)合低濃度順鉑對卵巢癌SKOV3細(xì)胞株體外生長的影響以及對人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生長作用的影響。 方法：1、電穿孔參數(shù)：選用電場600V/cm，電穿孔數(shù)5個，電容11μF，作用SKOV3細(xì)胞株。根據(jù)作用不同分為電穿孔加藥物組(E+M)；電穿孔組(E)，藥物組(M)和空白組(C)組。觀察各組細(xì)胞處理后生長變化及流式細(xì)胞儀測定細(xì)胞凋亡及周期變化； 2、建立人卵巢癌裸

2、鼠皮下移植瘤模型，隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)第1部分的四組后按如下處理：(1)E+M組：裸鼠局部腫瘤體內(nèi)注射2μg/ml的順鉑0.2ml，按電穿孔參數(shù)作用；(2)E組：瘤體內(nèi)注射0.2ml0.9％NS后電穿孔作用；(3)M組：瘤體內(nèi)注射2μg/ml順鉑0.2ml；(4)C組：在瘤體內(nèi)注射0.9％NS0.2ml。各組處理時間為瘤體皮下移植后4周至9周，每6天處理1次，共6次。 實(shí)驗(yàn)中觀察各組裸鼠皮下移植瘤生長情況，裸鼠體重變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)束72小時

3、處死裸鼠，用磁酶免法檢測各組裸鼠血中CA125水平；采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)(RT-PCR)，免疫組化法等檢測各組瘤組織中的血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)mRNA，VEGF受體KDR的表達(dá)以及TUNEL測腫瘤細(xì)胞的凋亡等。 結(jié)果：1、各組細(xì)胞不同方式處理后生長情況表明E+M組對SKOV3細(xì)胞的生長有良好抑制作用；E組對腫瘤細(xì)胞的抑制大于M組，低于E+M組；M組的低濃度順鉑對卵巢癌SKOV3細(xì)胞僅有微弱生長抑制。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析E+M組

4、同其他組比較差異顯著(P＜0.01)。 2、E+M組細(xì)胞凋亡明顯增大(最高達(dá)17.2％，而E組、M組和C組僅為4.8％、4.3％和4.1％)，差異顯著(P＜0.01)。細(xì)胞周期變化中，E+M組的細(xì)胞主要為G2-M期和S期細(xì)胞阻滯。 3、各組實(shí)驗(yàn)結(jié)束后裸鼠體重?zé)o明顯變化。裸鼠皮下移植瘤體積比較，E+M組瘤體明顯縮小，抑瘤率高達(dá)82.21％，較E組、M組和C組差異顯著(P＜0.01)。 4、E+M組腫瘤組織中的VEG

5、FmRNA表達(dá)較E組、M組和C組明顯降低，差異顯著(P＜0.01)。 5、各組裸鼠血中CA125變化情況表明，E+M組CA125均值為7.89±2.13，明顯低于其他三組(P＜0.05)。 6、免疫組化法測定VEGF受體KDR表達(dá)，E+M組明顯降低，同其他三組的KDR百分值比較差異顯著(P＜0.05)。 7、E+M組腫瘤組織內(nèi)細(xì)胞凋亡指數(shù)，大于E組、M組和C組，差異顯著(P＜0.05)。 結(jié)論：1、電場6