清肺合劑及相關(guān)藥材的質(zhì)量控制研究.pdf

1、清肺合劑是浙江省腫瘤醫(yī)院依據(jù)治療中晚期肺癌經(jīng)驗方開發(fā)的醫(yī)院制劑，由白花蛇舌草、浙貝母、夏枯草等10味中藥組方而成，功效清熱化痰解毒，軟堅散結(jié)消腫。用于晚期肺癌的治療，早、中期肺癌的輔助治療以及肺癌、肺炎、放射性肺炎引起的咳嗽多痰、胸痛、咳血等癥的治療。該制劑從1984年開始生產(chǎn)，生產(chǎn)20多年來，其效療受到醫(yī)生和病人的一致肯定。但是由于歷史原因，至今仍無完整的質(zhì)量評價體系，質(zhì)控項目簡單，缺少準(zhǔn)確可靠的含量測定方法。本文應(yīng)用高效液相色譜法分

2、別建立清肺合劑及夏枯草藥材的指紋圖譜和定量檢測方法，用于內(nèi)在質(zhì)量評價，以保證工藝和質(zhì)量的穩(wěn)定，也為清肺合劑的應(yīng)用和進一步研究打下基礎(chǔ)。
　　 首先，建立夏枯草藥材中咖啡酸、迷迭香酸、齊墩果酸及熊果酸含量的高效液相色譜測定方法。藥材粉碎后以75％乙醇溶液(含1％甲酸，V/V)超聲提取，在20℃柱溫下，采用Elite sinoCharom ODS-AP色譜柱，以0.01％磷酸溶液-乙腈為流動相進行梯度洗脫，采用波長切換法檢測(330

3、nm，203nm)。方法學(xué)驗證結(jié)果顯示，咖啡酸、迷迭香酸、齊墩果酸與熊果酸均具有良好線性，平均加樣回收率為93.7％～105.2％，RSD值均小于4.5％，所測夏枯草樣品中咖啡酸、迷迭香酸、齊墩果酸與熊果酸的含量分別為0.0401～0.0968 mg·g-1，0.99～2.57mg·g-1，0.243～0.556mg·g-1，4.06～8.13mg`g-1。本方法簡便、快速、準(zhǔn)確，可用于夏枯草中咖啡酸、迷迭香酸、齊墩果酸和熊果酸含量的測

4、定。
　　 研究同時建立了夏枯草藥材的高效液相指紋圖譜，并利用主成分分析法和聚類分析法對不同產(chǎn)地樣品進行鑒別評價。藥材粉碎后以含1％甲酸的甲醇(v/v)溶液超聲提取，以Elit SinoChrom ODS-AP色譜柱分離，乙腈-0.01％磷酸溶液梯度洗脫，流速1.0 mL·min-1，檢測波長203nm，以迷迭香酸為參照，建立了具有17個共有峰的夏枯草藥材指紋圖譜，各批次指紋圖譜和對照圖譜間相似度較高，通過模式識別研究將11批藥

5、材按產(chǎn)地不同分為4類。從結(jié)果可見，夏枯草質(zhì)量較為穩(wěn)定，指紋圖譜的模式識別直觀、可行，為夏枯草的生產(chǎn)和質(zhì)量控制提供了依據(jù)。
　　 本研究還建立了同時測定清肺合劑中原兒茶酸、綠原酸、咖啡酸、對香豆酸、野黃芩苷、迷迭香酸和芹菜素含量的方法。清肺合劑樣品以10％乙酸溶液(v/v)稀釋后，用乙酸乙酯萃取，有機相蒸干后以甲醇定容，分析色譜柱為Elite SinoChromODS-AP柱，50℃柱溫下以0.01％磷酸溶液(A)-乙腈(B)為流

6、動相進行梯度洗脫，采用波長切換方式檢測，進樣量20μL。原兒茶酸、綠原酸、咖啡酸、對香豆酸、野黃芩苷、迷迭香酸和芹菜素的峰面積與其濃度之間均具有良好的線性關(guān)系，平均加樣回收率為94.4％～98.5％，RSD均小于4.60％，所測清肺合劑樣品中原兒茶酸、綠原酸、咖啡酸、對香豆酸、野黃芩苷、迷迭香酸和芹菜素的含量分別為8.50～9.98 mg·L-1、5.77～10.89 mg·L-1、0.435～0.826 mg·L-1、1.48～4.1

7、3 mg·L-1、22.9～109.7 mg·L-1、6.26～14.8 mg·L-1、2.38～7.83mg·L-1。本方法簡便、快速、準(zhǔn)確，可同時測定清肺合劑中原兒茶酸、綠原酸、咖啡酸、對香豆酸、野黃芩苷、迷迭香酸、芹菜素的含量。
　　 最后，我們建立了清肺合劑的高效液相指紋圖譜，并對16批樣品進行評價。采用反相高效液相色譜法，Elit SinoChrom ODS-AP色譜柱，乙腈-0.01％磷酸溶液梯度洗脫，流速1.0 m