熱處理對UVB輻射后人表皮黑素細胞活性影響的研究.pdf

1、目的：
　　白癜風是一種常見的以局部或全身皮膚黏膜色素脫失為特征的皮膚病。人群患病率約為0.1～2％,多于幼年起病，無明顯種族及性別差異。皮損可發(fā)生于任何部位，皮膚病理顯示皮損處表皮黑素細胞明顯減少或消失。該病病因不明，目前認為可能與遺傳、自身免疫異常、氧化應激、神經(jīng)精神等因素有關。白癜風臨床治療較為棘手，主要包括藥物治療、光療、手術治療等。光療，特別是波長為311～313nm的中波紫外線，由于療效確切、安全可靠，現(xiàn)已成為白癜風臨

2、床治療的首選方法之一。
　　近年來，人們逐漸發(fā)現(xiàn)熱處理(42℃,1h）與紫外線相似，能夠增加黑素細胞的酪氨酸酶活性及黑素合成，促使黑素細胞和角質(zhì)形成細胞共培養(yǎng)體系中酪氨酸酶相關蛋白-1陽性的黑素細胞明顯增多；同時，以熱效應為主的紅外線可明顯減少大劑量UVB輻射誘導的角質(zhì)形成細胞凋亡。以上結(jié)果提示我們熱與UVB的聯(lián)合治療可能將成為白癜風治療的重要手段。本實驗研究熱處理對UVB輻射后人表皮黑素細胞的增殖活性、酪氨酸酶活性、黑素合成及細

3、胞周期的影響，并初步探討其機制，為今后熱療與UVB聯(lián)合應用治療白癜風等色素脫失性皮膚病提供理論依據(jù)。
　　方法：
　　1.以體外培養(yǎng)的正常人黑素細胞作為研究對象，分別以20、30、50、70、90、120、180mJ/cm2 NB-UVB輻射，采用四甲基偶氮唑藍比色法（MTT）檢測細胞存活率，并選擇最佳照射劑量進行后續(xù)實驗。
　　2.以42℃,1h為熱處理劑量，將黑素細胞分為四組：正常對照組、UVB組、加熱組、UVB+

4、熱組，分別給予不同干預，連續(xù)3d，末次干預24h后以MTT法檢測細胞增殖活性，左旋多巴(L-Dopa)為底物測定酪氨酸酶活性，NAOH法測定黑素含量，流式細胞儀檢測細胞周期變化。
　　結(jié)果：
　　1.分別以20、30、50、70、90、120、180mJ/cm2 UVB連續(xù)照射黑素細胞3d后，細胞存活率隨著劑量的增加而降低，選擇50mJ/cm2作為最佳照射劑量。
　　2.黑素細胞經(jīng)不同干預后比較細胞增殖活性，UVB組較

5、對照組減少7.1％（P>0.05），加熱組、UVB+熱組細胞較對照組分別增加25.3％和58.1％（P<0.05）。熱處理與UVB共同干預具有協(xié)同作用。
　　3.黑素細胞經(jīng)不同干預后，UVB組、加熱組、UVB+熱組細胞的酪氨酸酶活性較對照組分別增長3.8％、11.5％和31.9％（P<0.05），三組細胞的黑素含量較對照組分別增加17.5％、31.6％和67.3％（P<0.05）。熱處理與UVB輻射聯(lián)合干預具有協(xié)同作用。
　

6、　4.黑素細胞給予不同干預后，UVB組、加熱組、UVB+熱組處于G1期的細胞較對照組分別下降24.61％、13.16％和32.02％（P<0.05）；處于S期的細胞較對照組分別增加15.02％、8.58％和17.14％（P<0.05），處于G2期的細胞分別增加12.93％、7.52％、23.60％（P<0.05）。熱處理與UVB輻射聯(lián)合干預具有協(xié)同作用。
　　結(jié)論：
　　1.熱處理（42℃,1h）能有效促進黑素細胞增殖，與U