UVB輻射對人成纖維細胞5-mC和5-hmC水平的影響.pdf

1、目的:1.探討UVB輻射對體外培養(yǎng)人成纖維細胞增殖能力的影響。2.探討UVB輻射對體外培養(yǎng)人成纖維細胞5-甲基胞嘧啶(5-mC)和5-羥甲基胞嘧啶(5-hmC)水平的影響。
　　方法:1.常規(guī)體外培養(yǎng)原代人成纖維細胞，將細胞分為兩組:空白對照組和UVB處理組（累積劑量50mJ/cm2 UVB輻射）;2.四甲基偶氮唑鹽(MTT)法檢測成纖維細胞增殖情況;3.HE染色觀察細胞形態(tài)學(xué)變化;4.免疫組織化學(xué)ABC法檢測成纖維細胞5-mC和

2、5-hmC表達水平;5.免疫熒光法檢測成纖維細胞5-mC和5-hmC表達水平;
　　結(jié)果:1.HE染色觀察細胞形態(tài)變化:空白對照組的成纖維細胞排列規(guī)則，成漩渦狀或柵欄狀，細胞形態(tài)呈長梭形，胞質(zhì)豐滿，胞膜完整，可見核分裂象;UVB處理組的成纖維細胞與空白對照組相比，細胞數(shù)目明顯減少且排列不規(guī)則，細胞變得寬大扁平，多數(shù)呈現(xiàn)多角形，胞質(zhì)疏松透明，邊界變得不清楚，胞核內(nèi)顆粒物增多，核分裂象少見。2.MTT檢測結(jié)果為UVB處理組細胞的吸光度

3、值隨時間（第24、48、72、96、120小時5個時間點）升高并不顯著，而空白對照組細胞的吸光度值則明顯升高;且空白對照組在72h、96h、120h各時間點吸光度值均明顯高于UVB照射組(P＜0.05)。3.免疫組織化學(xué)ABC法檢測空白對照組5-hmC表達明顯低于處理組，而5-mC表達明顯高于處理組(P＜0.05)。4.免疫熒光法檢測結(jié)果同免疫組織化學(xué)ABC法:空白對照組5-hmC表達水平明顯低于處理組，而5-mC表達水平明顯高于處理組