歐前胡素,異歐前胡素,芍藥苷對人表皮黑素細胞生物活性及遷移的影響.pdf

1、 目的：通過體外建立模擬正常生理狀態(tài)的人表皮黑素細胞培養(yǎng)體系,觀察白芷的兩種主要單體歐前胡素、異歐前胡素和白芍的主要單體芍藥苷對黑素細胞生物活性及遷移的影響,從而探討這三種中藥單體對黑素細胞的作用機制,為色素性疾病的治療提供新的思路。方法：1、體外培養(yǎng)模擬皮膚正常生理狀態(tài)的人表皮黑素細胞；2、檢測不同濃度的三種中藥單體(歐前胡素、異歐前胡素、芍藥苷)對黑素細胞增殖活性的影響(MTT法)；3、檢測不同濃度的三種中藥單體(歐前胡素、異歐前

2、胡素、芍藥苷)對黑素細胞酪氨酸酶活性的影響(L-DOPA法)；4、檢測不同濃度的三種中藥單體(歐前胡素、異歐前胡素、芍藥苷)對黑素細胞黑素合成的影響( NaOH 法)；5、采用Transwell小室檢測三種中藥單體(歐前胡素、異歐前胡素、芍藥苷)對黑素細胞遷移的影響。以上全部數(shù)據(jù)采用SPSS統(tǒng)計軟件17.0版進行分析。結(jié)果：1、歐前胡素組在濃度為 20μg/mL 和 50μg/mL 時；異歐前胡素組在濃度為5μg/mL、10μg/mL、

3、20μg/mL 時；芍藥苷組在濃度為 5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、50μg/mL 時均顯示出顯著的促進黑素細胞增殖的作用。各組中藥單體在 100μg/mL 時并未對黑素細胞增殖產(chǎn)生明顯的抑制作用,細胞仍顯示較好的生長。各組中藥單體對黑素細胞增殖的促進作用均是低濃度時呈濃度依賴性增強,而較高濃度時反而作用力度下降,由實驗結(jié)果可見,10μg/mL為芍藥苷和補骨脂素的最佳作用濃度；20μg/mL 為歐前胡素和異歐前胡素的最佳

4、作用濃度。其中5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL濃度時的異歐前胡素組促細胞增殖能力強于同濃度的補骨脂素組。2、歐前胡素組在濃度為20μg/mL、50μg/mL 時；異歐前胡素組在濃度為 10μg/mL、20μg/mL 時；芍藥苷組在10μg/mL、20μg/mL、50μg/mL濃度時；均顯示出上調(diào)黑素細胞酪氨酸酶活性的作用,并且其作用強度與同濃度的補骨脂素組相似。各組中藥單體對調(diào)節(jié)黑素細胞酪氨酸酶活性的作用也呈現(xiàn)出低濃度時劑量

5、依賴性上調(diào),而高濃度時上調(diào)能力逐漸下降。10μg/mL 為異歐前胡素和芍藥苷的最佳作用濃度；20μg/mL 為歐前胡素和補骨脂素的最佳作用濃度。3、歐前胡素組在濃度為2.5μg/mL、5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、50μg/mL、100μg/mL 時均未顯示出對黑素合成的促進作用；異歐前胡素組僅在20μg/mL時顯著促進黑素合成；芍藥苷組在濃度為 20μg/mL、50μg/mL 時顯著的促進黑素合成。異歐前胡素組、芍藥苷

6、組、補骨脂素組促進黑素合成的作用均是低濃度時劑量依賴性上調(diào),高濃度時下降。20μg/mL 為異歐前胡素和補骨脂素的最佳作用濃度；50μg/mL 為芍藥苷的最佳作用濃度。4、10μg/mL、20μg/mL、50μg/mL 的歐前胡素組均無明顯促進黑素細胞遷移的作用；異歐前胡素組在這三個濃度時促黑素細胞遷移的作用呈現(xiàn)濃度依賴性加強,并于20μg/mL和50μg/mL時顯示出極顯著的促進黑素細胞遷移的作用,與空白對照組比較在統(tǒng)計學(xué)上具有顯著性

7、差異(P<0.01)；芍藥苷組在20μg/mL時極顯著的促進黑素細胞遷移,與空白對照組比較在統(tǒng)計學(xué)上具有顯著性差異(P<0.01)；補骨脂素組(陽性對照組)在 10μg/mL、20μg/mL、50μg/mL 三個濃度均顯著的促進黑素細胞遷移,其中20μg/mL時其作用強度最高；50μg/mL濃度組的異歐前胡素和補骨脂素均極顯著的促進黑素細胞遷移,與空白對照組比較在統(tǒng)計學(xué)上具有顯著性差異(P<0.01),并且此時兩者作用強度相當(dāng)。結(jié)論：1

8、、歐前胡素、異歐前胡素、芍藥苷均能促進黑素細胞的增殖,且在較高濃度(100μg/mL)時對細胞無明顯毒性作用,證實了這三種中藥單體的安全性。并且異歐前胡素促黑素細胞增殖活性能力強于補骨脂素。2、歐前胡素、異歐前胡素、芍藥苷均能上調(diào)黑素細胞酪氨酸酶的活性,且作用強度與補骨脂素相似。3、異歐前胡素和芍藥苷均能促進黑素細胞的黑素合成,而歐前胡素未檢測出促進黑素合成的作用。4、20μg/mL、50μg/mL組的異歐前胡素和20μg/mL組的芍藥