天然產(chǎn)物中SARS冠狀病毒主蛋白酶抑制劑的篩選.pdf

1、天然產(chǎn)物又稱次級代謝產(chǎn)物是指動物、植物、昆蟲、海洋生物和微生物體內(nèi)的組成成分或其代謝產(chǎn)物，其具有結(jié)構(gòu)的多樣性和生物活性的多樣性等特點。天然產(chǎn)物及其衍生物在以往的疾病治療中發(fā)揮了非常重要的作用，也是當(dāng)今藥物研發(fā)過程中最具潛力的資源之一。
　　高通量篩選技術(shù)是指以分子水平和細(xì)胞水平的實驗方法為基礎(chǔ)，通過數(shù)量龐大的藥品樣品庫來對不同病毒靶標(biāo)進(jìn)行篩選，從而可以快速尋找到最好的先導(dǎo)化合物，用于新藥的研究開發(fā)。
　　SARS冠狀病毒主要

2、蛋白酶（簡稱主蛋白酶）在SARS冠狀病毒轉(zhuǎn)錄和復(fù)制過程中起主要作用。如果能夠抑制SARS冠狀病毒主蛋白酶的水解作用，那么將會有效地抵御SARS冠狀病毒對人體的侵染。因此，SARS冠狀病毒的主蛋白酶是抗SARS藥物篩選的一個主要靶標(biāo)。
　　本課題首先完成了1307種的中藥混合物備選庫、3356種的天然產(chǎn)物片段庫及224種天然產(chǎn)物純品庫的建立。然后利用主蛋白酶體外酶活的篩選體系、結(jié)合傳統(tǒng)的植物化學(xué)成分分離手段對中藥材進(jìn)行活性追蹤下的分

3、離純化。通過篩選已經(jīng)從224種天然產(chǎn)物純品庫中篩選得到10種小分子化合物，其中有5個化合物IC50值100μM以下，其中活性最好的WBY20的IC50值達(dá)到了16.58μM。在體外酶活篩選體系下確定了6種中藥材為備選藥物，通過對其中4種中藥材進(jìn)行活性追蹤下的分離純化得到化合物28個，其中有抑制活性的化合物有14個，有11個化合物的IC50值在200μM以下，有4個化合物的IC50在100μM以下，活性最好的化合物IC50值為60μM左右