裸鼠荷人胃癌模型的建立及病理特征探討.pdf

1、研究背景：
　　胃癌是消化道常見的惡性腫瘤，近年來在全球其發(fā)病率和死亡率呈逐年上升趨勢，建立胃癌動物模型是對此病種進(jìn)行研究的基礎(chǔ)。目前將人類腫瘤細(xì)胞系移植到免疫缺陷的裸鼠體內(nèi)所建立的人類異種移植物腫瘤模型，已經(jīng)廣泛用于臨床前抗癌藥藥效的檢測。但是這種模型存在很多缺點，諸如能夠在小鼠體內(nèi)生長且可以建立模型的腫瘤細(xì)胞系數(shù)量有限，每種腫瘤只有很少的腫瘤細(xì)胞株可以建立模型。而且腫瘤細(xì)胞移植成功率較低，腫瘤模型生物學(xué)特征與病人原發(fā)腫瘤相差懸

2、殊，為了能更好地研究胃癌的防治及發(fā)病機(jī)制，建立穩(wěn)定的、可靠的、合適的動物模型是十分必要的。
　　研究目的：
　　1建立裸鼠荷人胃癌動物模型，為胃癌患者的個體化治療、新藥研發(fā)及其相關(guān)研究提供可靠的動物模型。
　　2探討腫瘤接種成功率與患者性別、年齡、腫瘤位置、臨床分期的關(guān)系。
　　3與裸鼠皮下注射細(xì)胞系所建立的胃癌模型在組織病理學(xué)上進(jìn)行比較，觀察兩種方法所建立的模型與患者腫瘤哪種更為接近。
　　方法：

3、　　1.使用人胃癌標(biāo)本建立裸鼠皮下腫瘤模型：從當(dāng)?shù)蒯t(yī)院采集新鮮胃腫瘤標(biāo)本，將瘤塊修剪成約2-3mm3，然后用套管針將其注射到BALB/c裸鼠側(cè)腹皮下。男性病人的腫瘤組織接種到雄性裸鼠皮下，女性病人的瘤塊接種到雌鼠皮下。待第一代荷瘤鼠瘤塊長至500mm3時，取出瘤塊，一部分進(jìn)行傳代接種，另一部分標(biāo)本浸泡于4％的多聚甲醛中固定，用于病理學(xué)檢測。如此連續(xù)傳代至第五代。觀察每一代荷瘤鼠的活動狀況、反應(yīng)能力、瘤體生長情況及移植瘤組織病理學(xué)變化。<

4、br>　　2.觀察移植瘤建模成功情況，計算接種成功率，用SPSS11.0統(tǒng)計學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)，并比較接種成功率與患者性別、年齡、腫瘤位置、臨床分期的關(guān)系
　　3.使用腫瘤細(xì)胞系建立裸鼠皮下腫瘤模型：使用胃癌細(xì)胞系BGC823、MGC803、和NC187進(jìn)行裸鼠皮下接種。觀察瘤體生長情況并對瘤組織進(jìn)行病理學(xué)檢查。比較兩種方法所建立的腫瘤動物模型，哪種更與患者腫瘤接近。
　　結(jié)果：
　　1共接種了56例胃癌患者的新鮮腫瘤組織

5、標(biāo)本于裸鼠皮下，其中17例接種成功，成功率為30％。成功率與患者性別、年齡、腫瘤位置、臨床分期無明顯關(guān)系。
　　2腫瘤生長曲線呈直線型增長，腫瘤大小均勻。
　　3與使用細(xì)胞系所建立的胃癌模型在病理學(xué)(H&E染色及免疫組化檢測Ki-67蛋白表達(dá))上進(jìn)行比較，裸鼠荷人胃癌模型的腫瘤組織與患者腫瘤更為接近。
　　結(jié)論：可以成功建立裸鼠荷人胃癌皮下腫瘤模型，并與人胃癌病理標(biāo)本相一致，為治療胃癌新藥的研發(fā)、胃癌患者的個體化治療及