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1、 目的:探究體內(nèi)轉(zhuǎn)染腺病毒載體Ad/CMV-hTGF-β1對兔椎間盤退變的保護作用,主要是對椎間盤髓核細(xì)胞中Ⅰ型、Ⅱ型膠原和成纖維細(xì)胞生長因子(FGF)的表達的影響,并初步討論其可能的作用機制,為椎間盤退變的生物學(xué)預(yù)防與治療提供理論基礎(chǔ)。方法:純種成年新西蘭大白兔20只,隨機分為實驗組和對照組,每組10只。采取腹部手術(shù)入路,逐層切開軟組織,暴露腰椎間盤,用微量注射器取本院骨科實驗室構(gòu)建的腺病毒為載體的Ad/CMV-hTGF-β1(滴度
2、為6x106pfu)20微升直接注射于腰4,5椎間盤髓核內(nèi);對照組僅進行相應(yīng)的外圍手術(shù)操作,椎間盤未做任何處理。手術(shù)后3周取出椎間盤組織,常規(guī)石蠟包埋,組織切片,通過普通HE染色觀察髓核組織細(xì)胞學(xué)形態(tài);用免疫組織化學(xué)方法染色顯示各組椎間盤組織髓核細(xì)胞中Ⅰ型、Ⅱ型膠原含量的變化和成纖維細(xì)胞生長因子(FGF)的表達情況;并用VIDAS圖象分析系統(tǒng)進行半定量分析。結(jié)果:普通HE染色結(jié)果顯示2組椎間盤髓核組織形態(tài)基本相同。免疫組織化學(xué)染色顯示:
3、實驗組椎間盤髓核細(xì)胞內(nèi)Ⅰ型膠原的表達比對照組低,OPTDM值分別為實驗組0.1804±0.0211,對照組0.2768±0.0161,統(tǒng)計學(xué)比較差異有顯著性(P<0.05);Ⅱ型膠原的表達結(jié)果則正好相反,實驗組比對照組高,OPTDM值分別為實驗組0.6936±0.0312,對照組0.5068±0.0235,統(tǒng)計學(xué)比較差異有顯著性(P<0.05);實驗組椎間盤髓核細(xì)胞FGF的表達比對照組高,OPTDM值分別為實驗組0.4354±0.019
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