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1、目的:建立急性實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎(EAE)模型,觀察補(bǔ)腎通絡(luò)方能否有效預(yù)防EAE大鼠發(fā)病,探討補(bǔ)腎通絡(luò)方預(yù)防性治療急性EAE大鼠的部分作用機(jī)制,為臨床研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法:豚鼠脊髓勻漿兩次免疫誘導(dǎo)wistar大鼠建立急性EAE模型,不同劑量補(bǔ)腎通絡(luò)方預(yù)防性給藥,觀察各組臨床體征,記錄每日臨床評(píng)分和體重變化,分別在發(fā)病高峰期和恢復(fù)期處死動(dòng)物,HE染色和髓鞘染色觀察病理改變;ELISA法測(cè)定血清內(nèi)白介素-10含量;RT-P
2、CR技術(shù)檢測(cè)大鼠腦組織MBP mRNA表達(dá)。 結(jié)果:(1)中藥高劑量組大鼠的發(fā)病率與模型組相比明顯減低(P<0.05);中藥高劑量組大鼠的神經(jīng)功能評(píng)分明顯低于模型組;中藥高劑量組大鼠的平均起病天數(shù)較模型組、中藥中劑量組及中藥低劑量組明顯延遲(P<0.01);中藥高劑量組大鼠的體重比明顯高于模型組、中藥中劑量組及中藥低劑量組(P<0.01)。 (2)中藥高、中劑量組大鼠腦和脊髓內(nèi)的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)程度和脫髓鞘改變與模型組及中藥
3、低劑量相比,均有不同程度減輕,中藥高劑量組比中藥中劑量組病變減輕程度更為明顯。 (3)中藥高劑量組與模型組、中藥中劑量及中藥低劑量組比較,血清IL-10含量急性期顯著升高(P<0.01),在緩解期無(wú)明顯差異(P>0.05);模型組與中藥中劑量組及中藥低劑量組之間比值比較無(wú)顯著性差異(P>0.05)。 (4)中藥高劑量組與模型組、中藥中劑量及中藥低劑量組比較,腦組織MBPmRNA表達(dá)有顯著差異(P<0.05),在緩解期顯著
4、升高(P<0.05);模型組與中藥中劑量組及中藥低劑量組之間比值比較無(wú)顯著性差異(P>0.05)。 結(jié)論: (1)補(bǔ)腎通絡(luò)方可以明顯降低EAE大鼠的發(fā)病率,推遲起病時(shí)間,抑制體重下降,減輕發(fā)病時(shí)神經(jīng)功能損傷的程度。 (2)補(bǔ)腎通絡(luò)方可以減輕EAE大鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)的程度。 (3)補(bǔ)腎通絡(luò)方可以增高血清IL-10水平,從而抑制炎性因子,糾正免疫紊亂,抑制EAE發(fā)病,且這種作用有劑量相關(guān)性。
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