MMP-9和TIMP-1在硬皮病模型鼠皮膚硬化過(guò)程中的作用以及辛伐他汀對(duì)硬皮病模型鼠皮膚硬化影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：探討MMP-9和TIMP-1在硬皮病模型鼠皮損纖維化形成中的作用以及辛伐他汀對(duì)硬皮病小鼠模型膠原合成、MMP-9和TIMP-1表達(dá)的影響。 方法：每日用博萊霉素(0.5mg/ml)0.1ml在小鼠背部皮下注射.并給予相應(yīng)處理，按實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)定時(shí)收集標(biāo)本，采用HE染色觀察皮膚組織變化特點(diǎn)，比色法檢察皮損羥脯氨酸含量，RT-PCR檢測(cè)小鼠硬皮病皮損前膠原(pro-COL1a1)mRNA表達(dá)水平以及Western blot檢測(cè)MMP

2、-9和TIMP-1表達(dá)情況。 結(jié)果：與對(duì)照組比較，硬化鼠模型皮損內(nèi)MMP-9蛋白表達(dá)水平在第1-2周明顯升高，第3-4周，仍有緩慢增加。而從第1周至第4周， TIMP-1蛋白表達(dá)水平隨著時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸升高，第4周達(dá)頂峰；且TIMP-1表達(dá)與皮損硬化程度(羥脯氨酸含量)相平行.早期給藥組中，模型組與陰性對(duì)照組比較，小鼠真皮內(nèi)膠原增粗，表真皮厚度、羥脯氨酸含量、proCOL1a1 mRNA以及SSP-9和TIMP-1蛋白表達(dá)明顯增加

3、(P<0.01)；而5mg/kg.d辛伐他汀處理組較模型組小鼠真皮厚度變薄(P<0.05)，羥脯氨酸含量降低(P<0.01)，皮損pro-COL1a1 mRNA、MMP-9和TIMP-1表達(dá)下降(P<0.05)。硬化后給藥組中，辛伐他汀處理組與空白對(duì)照組比較小鼠真皮厚度、羥脯氨酸含量以及MMP-9和TIMP-1均無(wú)明顯改善，但pro-COL1a1 mRNA表達(dá)下降(P<0.05)。 結(jié)論：在博萊霉素誘導(dǎo)的硬皮病小鼠模型中，皮損早

4、期以炎癥浸潤(rùn)為主，晚期則以纖維化為主；MMP-9可能主要在早中期參與了硬皮病鼠模型皮膚硬化過(guò)程中細(xì)胞外基質(zhì)膠原重構(gòu)，而TIMP-1主要在中晚期在皮膚硬化/纖維化過(guò)程中發(fā)揮重要作用。無(wú)論早期還是硬化后給藥，辛伐他汀均能抑制COL1a1 mRNA的表達(dá)；早期予以辛伐他汀處理可以減少膠原合成和MMP-9和TIMP-1表達(dá)，減輕博萊霉素誘導(dǎo)的小鼠皮膚硬化程度。硬化后予以辛伐他汀處理則對(duì)MMP-9和TIMP-1表達(dá)無(wú)明顯影響，皮膚硬化改善不明顯。