羧甲基殼聚糖智能釋藥肝靶向納米傳遞系統(tǒng)的構(gòu)建與評(píng)價(jià).pdf

1、肝炎、肝硬化和肝癌等慢性肝臟疾病,極大地危害人體的健康。盡管目前某些藥物能夠達(dá)到預(yù)期的治療效果,但由于給藥系統(tǒng)難以將藥物準(zhǔn)確傳遞到肝臟病灶細(xì)胞而降低了其生物利用度,并產(chǎn)生較大毒副作用,限制了其臨床應(yīng)用。解決這個(gè)問題的有效辦法就是靶向給藥系統(tǒng)。
　　 靶向給藥系統(tǒng)能將藥物傳遞到病灶部位,減少用藥劑量和給藥次數(shù),提高藥物治療指數(shù),避免或減輕藥物不良反應(yīng)。二硫鍵對(duì)谷胱甘肽的濃度刺激具有強(qiáng)的響應(yīng)性,由于血液中谷胱甘肽的濃度較低(微摩爾級(jí)

2、),二硫鍵很穩(wěn)定,能維系納米粒形態(tài)結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性,控制納米粒內(nèi)部包封的藥物不被釋放;而在細(xì)胞中,由于谷胱甘肽的濃度相對(duì)較高(毫摩爾級(jí)),二硫鍵能被谷胱甘肽分解,納米粒結(jié)構(gòu)受到破壞,內(nèi)部藥物被釋放出來。
　　 課題通過半乳糖配基對(duì)羧甲基殼聚糖氨基的修飾賦予其主動(dòng)肝靶向性,通過羧甲基殼聚糖羧基的巰基化,在組裝納米粒的過程中發(fā)生二硫鍵交聯(lián),賦予納米粒高穩(wěn)定性及智能性(即對(duì)谷胱甘肽濃度的刺激響應(yīng)性)。主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下:
　　

3、 (1)以包封率和粒徑為指標(biāo),采用正交設(shè)計(jì)優(yōu)化羧甲基殼聚糖納米粒制備工藝,考察了羧甲基殼聚糖分子量對(duì)納米粒粒徑及包封率的影響,隨著分子量的增大,納米粒的粒徑及包封率都增大。體外釋放試驗(yàn)表明,羧甲基殼聚糖納米?？蓪?duì)甘草酸起到緩釋作用,分子量較大的羧甲基殼聚糖制備的納米粒的體外釋放較慢。藥動(dòng)學(xué)研究表明,羧甲基殼聚糖納米粒較甘草酸溶液分布快藥理作用強(qiáng),能延長(zhǎng)體內(nèi)作用時(shí)間。小鼠體內(nèi)組織分布表明,將甘草酸制成納米粒后,在肝臟中的分布增大,在腎臟中

4、的分布減少,有利于提高療效,降低毒副作用。
　　 (2)以O(shè)-羧甲基殼聚糖為原料,采用還原胺化法合成得到半乳糖羧甲基殼聚糖(LAC-CMC)。在LAC-CMC納米粒的制備過程中,采用單因素法考察了LAC-CMC分子量、甘草酸濃度、LAC-CMC濃度對(duì)包封率及粒徑的影響。體外釋放試驗(yàn)表明,分子量較大的LAC-CMC制備的納米粒的體外釋放較慢。藥動(dòng)學(xué)研究表明,半乳糖羧甲基殼聚糖納米粒較羧甲基殼聚糖納米粒藥理作用強(qiáng)。小鼠體內(nèi)組織分布表

5、明,引入肝靶向基團(tuán)后,納米粒的肝靶向性增強(qiáng),毒副作用減弱。
　　 (3)半乳糖羧甲基殼聚糖在EDC和NHS催化下,與半胱胺反應(yīng),得到N-半乳糖-O-巰基化羧甲基殼聚糖。采用Ellman's試劑測(cè)定了巰基的含量,并考察了半胱胺的用量、反應(yīng)的pH值、反應(yīng)時(shí)間對(duì)巰基含量的影響。體外釋放實(shí)驗(yàn)表明,交聯(lián)納米粒在模擬血液中72小時(shí)的釋放較少,而在模擬細(xì)胞液中72小時(shí)能將藥物大量的釋放出來,充分證明了交聯(lián)納米粒的智能釋藥性。藥代動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)表明