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1、為了探討下丘腦室旁核-促皮質(zhì)激素釋放激素(PVN-CRH)和藍斑-去甲腎上腺素(LC-NE)這兩大應(yīng)激系統(tǒng)間的相互關(guān)系,該實驗在寒冷應(yīng)激條件下,觀察大鼠前腦(包括PVN)和后腦(包括LC)的c-fos表達,并用雙重染色方法,確定表達Fos神經(jīng)元的化學(xué)性質(zhì).同時,用放免方法測定血漿ACTH含量,以反映下丘腦-垂體-腎上腺皮質(zhì)(HPA)軸的功能.最后用6-羥基多巴胺(6-OHDA)損毀腦內(nèi)去甲腎上腺素(NE)能系統(tǒng)后,觀察應(yīng)激誘導(dǎo)的腦內(nèi)Fo
2、s表達和血漿ACTH含量的改變.實驗結(jié)果顯示:(1)寒冷應(yīng)激可使多個腦區(qū)Fos蛋白明顯增高,包括前腦的室旁核(PVN)、視上核(SON)、下丘腦背內(nèi)側(cè)核(DMH)、下丘腦腹內(nèi)側(cè)核(VMH)、外側(cè)隔核腹側(cè)區(qū)(LSV)、中央杏仁核(CAN)、內(nèi)側(cè)視前區(qū)(MPO)、下丘腦室旁核前小細胞亞核(PaAP)和后腦的孤束核(NTS)、藍斑(LC)、A5等部位.側(cè)腦室內(nèi)注射6-OHDA后寒冷應(yīng)激,上述部位的c-fos表達明顯減少.(2)雙重染色顯示,寒
3、冷應(yīng)激誘導(dǎo)的Fos樣免疫反應(yīng)陽性顆??梢娪谑遗院?PVN)和視上核(SON)中的部分加壓素(AVP)陽性神經(jīng)元及孤束核(NTS)、藍斑(LC)中的部分酪氨酸羥化酶(TH)陽性神經(jīng)元.側(cè)腦室內(nèi)注射6-OHDA后被激活的AVP陽性神經(jīng)元明顯減少.(3)血漿ACTH的放射免疫測定結(jié)果顯示,寒冷應(yīng)激后血漿ACTH水平明顯升高;側(cè)腦室注射6-OHDA后再應(yīng)激,可部分阻斷血漿ACTH的反應(yīng).結(jié)果提示:寒冷應(yīng)激可激活下丘腦PVN-AVP能神經(jīng)元系統(tǒng)和
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