HRP及Hb發(fā)光分析法聯(lián)用FIA在臨床檢驗(yàn)中的應(yīng)用研究.pdf

1、本文選用了辣根過(guò)氧化物酶(HRP)以及血紅蛋白(Hb)分別作為過(guò)氧化物酶和模擬酶的典型，應(yīng)用了酶聯(lián)分析技術(shù)，采用分子發(fā)光法(熒光，化學(xué)發(fā)光)并聯(lián)用流動(dòng)注射(FIA)，分別研究了在臨床中的應(yīng)用，測(cè)定了人體血清中的葡萄糖和免疫球蛋白G(IgG)的含量，其結(jié)果均令人滿意： 1、利用血紅蛋白具有類似于辣根過(guò)氧化物酶的催化活性部位和空間結(jié)構(gòu)，將其應(yīng)用到催化過(guò)氧化氫-對(duì)甲基苯酚的熒光體系中，結(jié)合流動(dòng)注射技術(shù)，從而建立了血紅蛋白催化熒光法聯(lián)用

2、流動(dòng)注射技術(shù)測(cè)定人體血清中葡萄糖的新方法，測(cè)定結(jié)果令人滿意。該法進(jìn)樣頻率為23樣/小時(shí)，線性范圍為3.0×10-5～3.0×10-4mol·L-1，檢出限可至3.8×10-6mol·L-1。 2、基于葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化并釋放過(guò)氧化氫，將其偶合到與魯米諾的發(fā)光體系中，同時(shí)采用牛血紅蛋白作為發(fā)光體系的催化劑，其發(fā)光強(qiáng)度在一定范圍內(nèi)與過(guò)氧化氫的濃度成良好的線性關(guān)系，據(jù)此建立了一種間接測(cè)定人體血清中葡萄糖含量的新方法。本法聯(lián)用F

3、IA技術(shù)，進(jìn)樣頻率為112個(gè)/小時(shí)，線性范圍為3.0×10-6mol·L-1～1.0×10-4mol·L-1，檢出限可至1.4×10-7mol·L-1。 3、基于非競(jìng)爭(zhēng)性異相免疫反應(yīng)的模式，將固定有人體IgG的免疫親和柱安裝在化學(xué)發(fā)光檢測(cè)器前，由于抗原抗體特異性的結(jié)合，使得在上流路前的預(yù)孵育過(guò)程中，待測(cè)定的IgG與HRP標(biāo)記的羊抗人IgG充分反應(yīng)，而后過(guò)量的HRP標(biāo)記的羊抗人IgG在載流的帶動(dòng)下進(jìn)入免疫柱，與固定在免疫柱中的Ig

4、G發(fā)生反應(yīng)，之后加入發(fā)光底物，免疫親和柱上的HRP標(biāo)記的羊抗人IgG中的酶部分——HRP能夠催化發(fā)光底物產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光，根據(jù)發(fā)光強(qiáng)度的大小，從而間接測(cè)定待測(cè)的人體血清中的IgG的含量。本文利用4-IMP作為發(fā)光增強(qiáng)劑，建立了流動(dòng)注射非競(jìng)爭(zhēng)性免疫反應(yīng)測(cè)定人體血清中的IgG的新方法，該實(shí)驗(yàn)檢測(cè)的人體血清中的IgG的線性范圍為1×10-8g·mL-1～9×10-7g·mL-1，回歸方程為y=7027-4.204×109x，檢出限為4.6×10-