金瘡小草醇提物對(duì)小鼠肺纖維化的影響及其機(jī)制研究.pdf

1、目的：本課題旨在觀察金瘡小草醇提物抗博萊霉素誘導(dǎo)的小鼠肺纖維化作用,并探討其抗肺纖維化作用機(jī)制。
　　方法：采用一次性鼻腔滴注博萊霉素制備肺纖維化小鼠模型。
　　（1）肺纖維化早期干預(yù)：小鼠隨機(jī)分為空白組、模型組、陽性組、金瘡小草高劑量組（8g生藥/kg）、中劑量組（4g生藥/kg）、低劑量組（2g生藥/kg）。各給藥組于造模后第1d開始相應(yīng)的干預(yù)，分別于干預(yù)第7d、14d、28d處死各組動(dòng)物。按小鼠體重計(jì)算肺系數(shù)，測定血清

2、和肺組織勻漿中超氧化物岐化酶（SOD）活力、丙二醛（MDA）含量、肺組織中羥脯氨酸（HYP）含量；HE及Masson染色，觀察肺組織病理切片，對(duì)肺泡炎及肺纖維化程度分級(jí)；ELISA法檢測肺組織勻漿中白介素-1β（IL-1β）含量以及免疫組化法測定肺組織中核因子-кB（NF-кB）表達(dá)。
　?。?）肺纖維化進(jìn)展期治療：造模14d后，分組同上，各組進(jìn)行相應(yīng)治療，分別于治療第14d、28d處死各組小鼠，觀察指標(biāo)同上。
　?。?）急

3、性毒性試驗(yàn)：通過預(yù)實(shí)驗(yàn)，確定一次灌胃藥物后0%致死劑量（Dn）和100％致死劑量（Dm），并在Dn和Dm之間設(shè)5個(gè)劑量組，給藥后立即觀察和記錄中毒癥狀和死亡情況，觀察期為14d，計(jì)算半數(shù)死量（LD50）及其95%可信區(qū)間。
　　結(jié)果：（1）對(duì)小鼠肺纖維化早期干預(yù)后，各給藥組小鼠毛色、體重等一般情況優(yōu)于模型組，第28d時(shí)高劑量組肺系數(shù)較模型組顯著降低（P＜0.05），第28d時(shí)陽性組、高、低劑量組小鼠體重較模型組顯著增加（P＜0.0

4、5）；金瘡小草醇提物高、低劑量組的動(dòng)物死亡率均低于模型組；金瘡小草醇提物能調(diào)節(jié)肺纖維化小鼠體內(nèi)的自由基代謝，顯著提高模型小鼠體內(nèi)總S OD活力，顯著降低MD A含量（P<0.05~0.01），其中金瘡小草醇提物高劑量在整個(gè)干預(yù)期均有顯著效果（P<0.01)；給藥第28d金瘡小草醇提物高、中劑量均能顯著降低HYP水平（P<0.05)；給藥第7d，金瘡小草醇提物各劑量均能顯著降低IL-1β水平（P<0.05~0.01），給藥第28d，金瘡小

5、草醇提物高劑量可顯著降低IL-1β水平（P<0.05)。病理形態(tài)學(xué)分析結(jié)果顯示，金瘡小草醇提物高、中劑量可減輕肺泡炎損傷和抑制肺纖維化病變程度（P＜0.01）。金瘡小草醇提物高劑量可降低NF-κB表達(dá)水平（P＜0.01）。
　　（2）對(duì)進(jìn)展期肺纖維化小鼠治療后，金瘡小草醇提物組動(dòng)物的死亡率均低于模型組；金瘡小草醇提物可調(diào)節(jié)肺纖維化小鼠體內(nèi)的自由基代謝，顯著提高模型小鼠體內(nèi)總 SO D活力，顯著降低 MD A含量（P<0.05~0.

6、01），其中金瘡小草醇提物高劑量在整個(gè)治療均有非常顯著效果（P＜0.01）；金瘡小草醇提物高劑量于各時(shí)相均能顯著降低HYP水平（P<0.05)；治療28d，金瘡小草醇提物可非常顯著降低IL-1β水平（P＜0.01）。病理形態(tài)學(xué)觀察和分析結(jié)果顯示，金瘡小草醇提物可顯著抑制肺纖維化進(jìn)展期中肺泡炎、肺纖維化程度（P＜0.01）。免疫組化結(jié)果顯示，金瘡小草醇提物高、中劑量均可顯著降低肺組織中NF-κB表達(dá)水平（P＜0.01）。
　?。?）

7、急性毒性試驗(yàn)：給予金瘡小草醇提物后，部分小鼠出現(xiàn)中毒反應(yīng)并死亡，剖檢主要臟器未見病理變化，測得LD50=83.04g生藥/kg，LD50的95％可信限為69.05~99.85g生藥/k g。
　　結(jié)論：金瘡小草醇提物可能通過以下四方面，減輕肺纖維化的形成：（1）抑制炎性因子的釋放，發(fā)揮抗炎性損傷作用；（2）影響機(jī)體免疫系統(tǒng)功能，降低應(yīng)激反應(yīng)的強(qiáng)度；（3）影響膠原代謝過程，減少纖維蛋白的形成；（4）提高總SOD活力，降低MDA水平，