MiR-449a-b與Notch1在NSCLC組織中表達(dá)及其調(diào)控機(jī)制研究.pdf

1、目的:
　　研究Notch1與miR-449a/b在肺癌組織中的表達(dá)，并通過(guò)對(duì)兩者相關(guān)性的分析，以初步探討miR-449a/b與Notch1的靶向調(diào)控關(guān)系。
　　方法:
　　以NSCLC患者術(shù)后新鮮癌組織與配對(duì)的癌旁組織為研究對(duì)象，分別通過(guò)westernblot、RT-PCR技術(shù)檢測(cè)肺癌組織及癌旁組織中Notch1的表達(dá)，并通過(guò)qRT-PCR檢測(cè)肺癌組織中的miR-449a/b表達(dá)，分析其與Notch1的相關(guān)性。同時(shí)利

2、用生物學(xué)分析和預(yù)測(cè)miR-449a/b的調(diào)控關(guān)系，并進(jìn)行雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。
　　結(jié)果:
　?、?在90例組織樣本中，癌組織中Notch1表達(dá)陽(yáng)性率為73.3％，在癌旁組織中為30％，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　?、?本實(shí)驗(yàn)在對(duì)90例標(biāo)本中Notch1蛋白表達(dá)水平與臨床病理因素的相關(guān)性分析中發(fā)現(xiàn)，不同的病理類型中的Notch1表達(dá)存在差異，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。另外，在Notch1與其他臨床病

3、理各因素的分析中，發(fā)現(xiàn)肺癌TNM分期與Notch1的表達(dá)顯著相關(guān)(P＜0.05)，但是在分析其與年齡因素、性別因素、瘤體位置、大小及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況方面未顯示出相關(guān)性（P＞0.05）。
　?、?組織樣本的qRT-PCR結(jié)果顯示，miR-449a高表達(dá)的樣本有42例，其中癌組織21例，癌旁組織21例，而miR-449b高表達(dá)的樣本有39例，其中癌組織18例，癌旁組織21例。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示miR-449a/b在癌組織及癌旁組織中表達(dá)均無(wú)

4、統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，提示其高表達(dá)與肺癌的相關(guān)性。另外，兩者表達(dá)水平與Notch1蛋白表達(dá)水平的結(jié)果匹配性均較差。
　?、?進(jìn)一步的雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)結(jié)果顯示，miR-449a/b對(duì)Notch13'UTR的調(diào)控作用不明顯，無(wú)顯著性差異。
　　結(jié)論:
　?、?Notch1在肺癌組織中高表達(dá)，且其高表達(dá)與組織學(xué)分型及TNM分期有關(guān)，提示Notch1的高表達(dá)可能與腫瘤的發(fā)生發(fā)展、組織學(xué)分型及癌細(xì)胞的侵襲能力相關(guān);
　?、?肺