Notch信號(hào)通路在急性肺損傷大鼠肺組織中表達(dá)的研究.pdf

1、目的:以內(nèi)毒素(LPS)復(fù)制的急性肺損傷大鼠模型為研究對(duì)象,觀察特異性抑制劑DAPT阻斷Notch信號(hào)前后,Notch1在肺組織表達(dá)的變化情況,探討Notch信號(hào)通路在急性肺損傷(ALI)發(fā)病中的作用。
　　方法:選取健康、成年SD大鼠32只,SPF級(jí),體重300g-500g,采用LPS氣管內(nèi)滴入的方法構(gòu)建急性肺損傷大鼠模型。將大鼠按隨機(jī)數(shù)字表法分為四組,每組雌雄各半,對(duì)照組:氣管內(nèi)不滴入任何試劑;急性肺損傷組:氣管內(nèi)滴入LPS稀

2、釋液;干預(yù)組:氣管內(nèi)滴入LPS稀釋液1小時(shí)后,即刻給予DAPT稀釋液;溶劑組:氣管內(nèi)滴入DMSO。4小時(shí)后放血處死大鼠,封閉氣管,分離肺臟,采集標(biāo)本。觀察大鼠肺濕/干重(W/D)比值變化,肺組織病理及動(dòng)脈血?dú)飧淖?用免疫組化方法檢測(cè)肺組織中Notch1表達(dá)情況。采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件,進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,兩個(gè)獨(dú)立樣本間的均數(shù)比較采用t檢驗(yàn),多個(gè)獨(dú)立樣本間的均數(shù)比較采用單因素方差分析法,組間兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)。
　　結(jié)果:

3、1.肺臟的大體形態(tài):對(duì)照組色澤柔和,呈淡粉紅色,質(zhì)地柔軟,邊界清楚,邊緣銳利,表面光滑,無出血點(diǎn);急性肺損傷組色澤光亮,大部分呈灰白或紫紅色,質(zhì)地較硬,邊界不清,邊緣圓鈍,存在廣泛出血點(diǎn),部分融合成片,表面凹凸不平,干預(yù)組介于兩者之間,溶劑組與對(duì)照組大致相同。2.動(dòng)脈血 PO2、PO2/FiO2及肺組織濕/干重(W/D)比值:急性肺損傷組PO2及 PO2/FiO2均顯著低于干預(yù)組(P<0.01)和對(duì)照組(P<0.01),溶劑組與對(duì)照組大

4、致同;與對(duì)照組比較,急性肺損傷組肺W/D比值顯著升高(P<0.01),干預(yù)組肺 W/D比值介于急性肺損傷組(P<0.01)和對(duì)照組(P<0.01)之間,溶劑組與對(duì)照組的肺W/D比值大致相同,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.01)。3.肺臟的組織形態(tài)學(xué):急性肺損傷組肺泡廣泛融合,腔內(nèi)存在大量的肺泡巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞,有透明膜形成,肺泡壁斷裂、薄厚不均,有炎性細(xì)胞侵潤(rùn),與對(duì)照組(P<0.01)比較,損傷明顯。干預(yù)組較急性肺損傷組損傷輕,無透明膜

5、形成(P<0.01),但較對(duì)照組有損傷,肺泡部分融合,腔內(nèi)有或無炎性細(xì)胞,肺泡壁增厚( P<0.01)。溶劑組與對(duì)照組比較,損傷差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.01)。4. Notch1蛋白的表達(dá):急性肺損傷組與對(duì)照組比較,Notch1蛋白的表達(dá)強(qiáng)度顯著增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。干預(yù)組目的蛋白Notch1的表達(dá)量較急性肺損傷組明顯下降(P<0.01),但較對(duì)照組有升高(P<0.01)。溶劑組和對(duì)照組比較,Notch1蛋白表達(dá)差異