2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩49頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、目的:
   支氣管肺發(fā)育不良(Bronchopulmonarydy splasia,BPD)是發(fā)生于早產(chǎn)兒的一種常見慢性肺疾病。一般認(rèn)為BPD的發(fā)生是與長期的機械通氣和輔助用氧有關(guān),然而越來越多的證據(jù)表明圍生期的宮內(nèi)感染(Intrauterineinfection)可能在BPD的發(fā)病中亦起著關(guān)鍵作用,宮內(nèi)感染通過影響肺泡細(xì)胞的死亡和炎癥反應(yīng)來發(fā)揮作用。
   目前國外研究發(fā)現(xiàn)宮內(nèi)感染的病原體主要是革蘭陰性菌,主要致病成

2、分是其胞壁上的脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)。LPS可與宿主細(xì)胞表面泛特異性受體Toll樣受體4(Tolllikereceptor4,TLR4)結(jié)合,通過TLR4信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑,激活急性炎癥反應(yīng),從而在多個環(huán)節(jié)致使宿主天然免疫系統(tǒng)的失衡,導(dǎo)致宿主肺組織處于一個適度的炎性預(yù)敏狀態(tài)和肺發(fā)育的異常,在后天的因素如機械通氣、高氧等共同作用下導(dǎo)致宿主肺組織炎性反應(yīng)的增強并最終引起B(yǎng)PD的發(fā)生。Notch信號通路由Notch受

3、體、配體和細(xì)胞內(nèi)效應(yīng)分子CSL蛋白以及Notch的調(diào)節(jié)分子等組成。在哺乳動物中共發(fā)現(xiàn)4類Notch基因,編碼4種Notch受體,即Notch1~4。Notch受體是一種單次跨膜蛋白,其結(jié)構(gòu)在進化過程中高度保守。Notch配體同樣為單次跨膜蛋白,在哺乳動物中鑒別出至少5種配體:Jagged1、Jagged2、Delta1、Delta3及Delta4。Notch信號通路參與肺癌、哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)、肺動脈高壓癥等多種肺部疾病的

4、病理過程,干預(yù)Notch信號有望阻抑這些疾病的發(fā)生及發(fā)展,為其預(yù)防和治療提供新思路。
   本研究擬使用Ⅱ型肺泡細(xì)胞(Mouse Lung Epithelial12,MLE12)和昆明小鼠E18.5肺組織為研究對象,利用LPS來建立模型,模擬宮內(nèi)感染。觀察Notch信號在LPS處理后的表達(dá)變化情況,隨后利用Notch信號抑制劑(DAPT)來研究Notch受體對Ⅱ型肺泡細(xì)胞炎癥反應(yīng)及細(xì)胞死亡的作用,進而探討Notch受體在BPD發(fā)

5、生中的可能機制,闡述Notch抑制劑在緩解炎癥反應(yīng)及增加存活率的作用,為臨床上治療BPD提供方案。
   方法:
   1、細(xì)胞培養(yǎng)
   2、體外培養(yǎng)E18.5肺切片
   3、RealtimePCR
   4、WesternBlotting
   5、WST
   6、細(xì)胞免疫熒光
   7、石蠟包埋及切片
   8、組織免疫熒光
   9、統(tǒng)計分析

6、r>   結(jié)果:
   1、肺發(fā)育過程中Notch表達(dá)變化情況
   隨著肺的發(fā)育進程,Notch1、2的表達(dá)呈現(xiàn)升高趨勢。
   2、LPS處理MLE12細(xì)胞后的生物學(xué)效應(yīng)
   (1)60μg/mlLPS處理24小時可能導(dǎo)致MLE12細(xì)胞凋亡和炎癥因子的大量釋放,但是10μg/mlLPS卻不能引起此效應(yīng)。
   (2)與此同時發(fā)現(xiàn)60μg/mlLPS處理24小時引起Notch1、Notch2

7、表達(dá)水平升高,但是10μg/mlLPS卻不能引起此效應(yīng)。
   3、阻斷Notch信號后,LPS處理MLE12細(xì)胞后的生物學(xué)效應(yīng)
   (1)LPS和DAPT聯(lián)合處理MLE12細(xì)胞使Notch1、Notch2表達(dá)量下降。
   (2)LPS和DAPT聯(lián)合處理MLE12細(xì)胞可能抑制了LPS所引起的細(xì)胞凋亡和炎癥因子的大量釋放。
   4、LPS處理E18.5肺切片24小時后的生物學(xué)效應(yīng)
   (1)

8、60μg/mlLPS處理E18.5肺切片24小時后同樣能觀察到炎癥因子IL6及NF-κb的mRNA升高。
   (2)與此同時,60μg/mlLPS處理E18.5n肺切片24dx時后發(fā)現(xiàn)Notch1,2的mRNA升高。
   5、LPS和DAPT聯(lián)合處理18.5肺切片24小時后的生物學(xué)效應(yīng)
   (1)LPS聯(lián)合DAPT處理E18.5肺切片24小時,抑制TLPS引起的Notch2蛋白的升高。
   (2)

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論