PAI-1在LPS誘導(dǎo)的急性肺損傷中的作用和可能機制.pdf

1、目的:研究纖溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)在脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的急性肺損傷中的表達水平及可能的作用機制。
　　 方法:在體外實驗中,采用LPS刺激肺上皮細(xì)胞系A(chǔ)549,分別在4小時、8小時、12小時和24小時各時間點觀察PAI-1和其他炎癥介導(dǎo)基因在mRNA水平的表達改變。另外,采用不同劑量的LPS刺激A549細(xì)胞,進一步明確PAI-1與炎癥介質(zhì)LPS的劑量依賴性。在體內(nèi)實驗中,給予野生型C57/BL6小鼠氣管內(nèi)滴注LP

2、S建立急性肺損傷的模型。通過ELISA測定了血漿中PAI-1的含量,并通過實時定量RT-PCR測定在各個時間點,PAI-1和其他炎癥介導(dǎo)基因的表達改變譜,從而揭示PAI-1在急性肺損傷中的作用和可能的機制。
　　 結(jié)果:體外實驗結(jié)果顯示,A549細(xì)胞在LPS刺激后隨著時間的改變,PAI-1的表達水平顯著升高,在4小時其表達水平與生理鹽水對照組相比已達2.24倍,持續(xù)升高達12小時,24小時時恢復(fù)正常;在給予LPS1mg/ul刺激

3、后12小時,隨著LPS的劑量增加,1ug/ml、5ug/ml和10ug/ml,PAI-1、MMP2和PPAR-γ的表達呈劑量依賴性。氣管內(nèi)滴注5mg/kgLPS,成功建立了急性肺損傷模型。血漿中PAI-1在LPS刺激后4小時顯著升高,24小時后更加明顯。同樣,隨著時間的改變,肺內(nèi)PAI-1mRNA表達也隨之上調(diào),最高達28倍。同時,MMP9、IL-1β和NF-κB的mRNA水平也明顯升高,而PPAR-γ和MMP2的表達水平反之下降。