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1、中文摘要前 言‘ 目 前 , 頸 淋 巴 結(jié) 轉(zhuǎn) 移 和 腫 瘤 局 部 復(fù) 發(fā) 是 影 響 喉 癌 預(yù) 后 的 最 主要因 素。 提高喉 癌 轉(zhuǎn)移的 早 期診斷 水平是 及時(shí) 正確處理頸部轉(zhuǎn)移病 灶的 關(guān) 鍵, 有 益 于提高臨 床 治 愈率。 以 往 單 獨(dú) 靠體檢 觸摸來(lái)判斷 頸淋巴 結(jié)轉(zhuǎn) 移所造成的 失 誤時(shí) 有發(fā)生。 C T 及其他影 像學(xué)檢測(cè)手 段的出 現(xiàn)雖已 表 現(xiàn)出 極大的 優(yōu)越性, 但是 仍然無(wú)法在術(shù)前準(zhǔn)確判斷頸 淋巴
2、 結(jié) 是否 存在隱匿 性 轉(zhuǎn)移。 人們 試圖 利用分子 生物學(xué)手段尋 找 一種能夠判斷腫瘤轉(zhuǎn)移潛力及影響轉(zhuǎn)移的相關(guān)因素的 方法。 近十 年人們發(fā)現(xiàn)血管生成因 子對(duì)血管生成的 作用以 及后者對(duì)腫瘤 生長(zhǎng)和 轉(zhuǎn) 移的 影響。腫 瘤細(xì)胞或其宿主 細(xì)胞間 質(zhì)的 各種細(xì) 胞能 產(chǎn)生多 種腫瘤血管生成因子( T A F ) , 其中 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子( V E G F ) 的 作用最為重要。V E G F 是已知最強(qiáng)烈的直接激活血管生成 蛋白 質(zhì),
3、 是可 溶性血管內(nèi) 皮細(xì) 胞促有絲分裂素和血管形成因子, 并能 增 加血管 通透性。 異常的V E G F 表達(dá)使血管生成急劇增加, 導(dǎo)致 腫 瘤進(jìn) 展且促進(jìn)轉(zhuǎn)移發(fā)生。 研究腫瘤血管生成因 子和腫瘤的 血 管生 成, 對(duì)于 早 期診斷、 預(yù)測(cè)腫瘤轉(zhuǎn)移 和判斷預(yù)后 具有十 分重 要的 意 義。目 前大多 應(yīng)用的 免 疫組織 化 學(xué)方法對(duì)類似微 轉(zhuǎn)移 小 病 灶進(jìn) 行診斷 有很大的 局限 性。 伴隨分 子 學(xué)和分子遺傳學(xué)的發(fā)展, 誕生了 許
4、多 可以 彌補(bǔ) 傳統(tǒng) 組織化 缺陷的 新技術(shù), 如逆轉(zhuǎn)錄一 聚 合酶 鏈?zhǔn)?反 應(yīng)( R T - P C R ) , 它能 從m R N A 分子水平半 定量 檢測(cè) 少量的 癌細(xì) 胞樣品( 能 在1 0 0 0 萬(wàn)至1 億個(gè)背景細(xì) 胞中 檢測(cè)出 一 個(gè) 表達(dá)瘤標(biāo)志的細(xì)胞) , 敏感性高特異性強(qiáng)。 藉此可預(yù)測(cè)腫 瘤 轉(zhuǎn) 移 傾向 或 對(duì)微 小病變 進(jìn)行 診斷。 免 疫 組化和R T 一 P C R 聯(lián)合應(yīng) 用, 可 對(duì)某 一待測(cè)基因同
5、時(shí) 從蛋白 和分子 兩種水平的表達(dá)情況拼行檢測(cè). 從而更好的 認(rèn)識(shí)和闡明該基因的 作用機(jī)制。 迄今為止,結(jié) 果R T = - P C R 檢測(cè)結(jié)果: 第一組 V E G F m R N A陽(yáng)性表達(dá) 1 2 例, 陽(yáng)性 率6 0 %; 第二組陽(yáng) 性表達(dá)3 例, 陽(yáng) 性率1 5 %; 第三組陽(yáng) 性表達(dá)4例, 陽(yáng) 性 率2 0 %。 第一 組與 第二組, 第 一組與第三組分別比 較, 其 結(jié) 果 差 異 具 有 顯 著 性 意 義( P 0
6、 . 9 2 . 3 ) 。 免疫組化檢測(cè)結(jié) 果: 第 一組V E G F 陽(yáng) 性表達(dá)1 3 例, 陽(yáng) 性率6 5 %; 第二 組陽(yáng) 性表達(dá)4 例, 陽(yáng) 性率2 0 %; 第三組陽(yáng) 性表達(dá)5 例, 陽(yáng) 性率2 5 %; 第一組與 第 二 組, 第一組與第三組分別比 較, 其結(jié)果差異具有顯著意義( P0 . 5 2 ' 3 ) a M V D 計(jì)數(shù): 第一組癌組織的M V D 平均 為( 1 4 . 8 5 9 土 4
7、. 9 2 6 ) 個(gè) / m m 2 m m, 第二 組癌組織 的M V D 平均為( 6 . 5 8 5 土 2 . 5 5 0 ) 個(gè) / I n m2 m m, 第 三 組 癌 組 織的M V D 平 均 為( 7 . 5 t 2 . 8 1 9 ) 個(gè) / I r n2 m m , 頸淋巴 結(jié)轉(zhuǎn)移陽(yáng) 性的 癌組織中M V D 計(jì)數(shù)顯著 增加( P < 0 . 0 0 0 5 ) .免 疫組化結(jié)果顯示6 0
8、 例喉癌標(biāo)本中V E G F 為陽(yáng)性表達(dá)的 共2 2 例, 平均M V D 為( 1 5 . 3 9 7 士 5 . 4 8 7 ) 個(gè) / m m 2 ; V E G F 陰 性者3 8 例, 平 均M V D 為( 7 . 3 9 2 1 3 . 2 0 8 ) 個(gè) / m m 2 , V E G F 表 達(dá)和 瘤內(nèi)M V D 有良 好的相關(guān)性( r 二 0 . 9 4 6 4 , P < 0 . 0 2 5
9、) a討 論V E G F 是根據(jù) 其促 血管內(nèi) 皮細(xì)胞 有絲 分裂的活性而 命名為血管內(nèi) 皮生長(zhǎng)因 子。因同時(shí) 具有增加血管通透性作用, 亦稱血管通 透因 子( V P F ) o V E G F 是 對(duì)血管生 長(zhǎng) 有 誘導(dǎo) 作用的 眾多 生長(zhǎng)因 子 中 作 用 強(qiáng)、 特 異 性 高的 唯 一一種以 特 異的 旁 分泌方 式 作用于 血 管內(nèi) 皮細(xì) 胞, 促 進(jìn)其增殖、 遷移及誘導(dǎo) 新生血管生成的 生長(zhǎng)因 子, 利于 腫瘤 發(fā)生
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