通過發(fā)酵策略及誘變選育來提高谷氨酰胺轉(zhuǎn)胺酶酶活.pdf

1、微生物谷氨酰胺轉(zhuǎn)胺酶(Microbial Transglutaminase，簡稱MTG，EC2.3.2.13)能催化多種蛋白質(zhì)分子間、分子內(nèi)的?；D(zhuǎn)移反應(yīng)，改善各種蛋白質(zhì)的功能性質(zhì)，在食品、化妝品、制藥等工業(yè)領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。
　　 本研究以提高吸水鏈霉菌(Streptomyces hygroscopicus)WSH03-13發(fā)酵產(chǎn)谷氨酰胺轉(zhuǎn)胺酶的產(chǎn)量為目標(biāo)，分別研究了吸水鏈霉菌的高密度培養(yǎng)和溶氧濃度對發(fā)酵過程的影響并通過

2、不同的誘變手段來篩選高酶活的菌株。主要內(nèi)容如下:
　　 1.對吸水鏈霉菌的高密度培養(yǎng)進(jìn)行了研究。通過考察不同初始葡萄糖濃度下的分批發(fā)酵，確定了最佳初始葡萄糖濃度為10 g/L。通過比較了不同的流加速率，確定在8-16h采用較高的的比生長速率(0.15 h-1)，后期降低比生長速率(0.10 h-1)這種較優(yōu)的葡萄糖流加速率組合可以獲得較高的菌體量。
　　 2.考察了添加氮源對Streptomyces hygroscopi

3、cus發(fā)酵產(chǎn)酶的影響。在菌體生長到最大值后添加氮源，促進(jìn)產(chǎn)酶。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，添加50 g/L的豆餅粉酶活最高可達(dá)到5.79U/mL。
　　 3.在3L罐中考察了不同的溶氧濃度對谷氨酰胺轉(zhuǎn)胺酶分批發(fā)酵的影響，確定了在0-20 h保持30%的溶氧濃度，通氣量1.25vvm；20 h后保持10%的溶氧濃度，通氣量1.25vvm的條件來進(jìn)行發(fā)酵，最終酶活可達(dá)到5.88 U/mL，實(shí)現(xiàn)了谷氨酰胺轉(zhuǎn)胺酶的高產(chǎn)量、高生產(chǎn)強(qiáng)度的統(tǒng)一。