纈沙坦對糖尿病腎病作用機制的實驗研究.pdf

1、目的：觀察纈沙坦對高糖環(huán)境下系膜細胞氧化應激水平的影響，研究纈沙坦對高糖刺激后系膜細胞基質沉積的影響，初步探討纈沙坦對糖尿病腎病作用的機制。 方法：1、高糖體外培養(yǎng)系膜細胞，不同濃度纈沙坦干預，以RT-PCR方法檢測細胞內NADPH氧化酶亞基p22<'phox>的mRNA表達的變化，并以DCFH-DA和HE標記細胞內活性氧(ROS)，流式細胞術檢測細胞內ROS表達改變，觀察纈沙坦對高糖刺激后系膜細胞內氧化應激水平的影響。2、不同

2、濃度纈沙坦作用高糖體外培養(yǎng)系膜細胞，選取纖維連接蛋白(FN)、纖溶酶原激活物抑制劑-1(PAI-1)、基質金屬蛋白酶(MMP-2)、基質金屬蛋白酶抑制因子-2(TIMP-2)反映基質合成和降解，RT-PCR方法檢測；選取細胞外基質重要相關因子轉化生長因子-β<,1>(TGF-β<,1>)，ELISA方法檢測，觀察纈沙坦對高糖下系膜細胞基質沉積的影響。 結果：1、高糖作用2天時，NADPH氧化酶亞基p22<'phox>的mRNA表

3、達無明顯變化，纈沙坦對其無影響，高糖作用5天后，p22<'phox>的mRNA表達增加，纈沙坦對高糖引起系膜細胞p22<'phox>的mRNA表達增加有下調作用，具濃度依賴性；高糖分別作用2天、5天的系膜細胞內，超氧陰離子(O<,2><'->)與過氧化氫(H<,2>O<,2>)隨著時間延長，升高愈加明顯，纈沙坦對其均具有下調作用，并呈濃度依賴性。2、纈沙坦能夠以濃度依賴關系抑制不同作用時間下高糖引起系膜細胞FN、PAI-1、TIMP-2