設(shè)計(jì)合成組蛋白去乙?；傅男》肿右种苿?pdf

1、在腫瘤的發(fā)生和發(fā)展過程中，表觀遺傳學(xué)修飾起著非常重要的作用。組蛋白修飾是其中的主要方式之一，主要包括乙?；⒓谆?、磷酸化、泛素化等。組蛋白修飾主要由兩種拮抗酶共同調(diào)控:組蛋白乙?；D(zhuǎn)移酶（HistoneAcetylTransferases，HATs）、組蛋白去乙?；福℉istoneDeacetylases，HDACs）。HDACs將組蛋白N-端賴氨酸殘基側(cè)鏈上的ε-氨基去乙酰化，因此，電荷量增多會(huì)促進(jìn)組蛋白與DNA鏈之間的相互作用，

2、從而影響染色質(zhì)結(jié)構(gòu)及基因的表達(dá)。HDACs的高表達(dá)會(huì)導(dǎo)致平衡失調(diào)從而引起腫瘤的發(fā)生，尋找高效抑制HDACs為靶點(diǎn)的抑制劑成為研發(fā)新型抗癌藥物的熱點(diǎn)。組蛋白去乙酰化酶抑制劑（HistoneDeacetylasesInhibitors，HDACIs）的結(jié)構(gòu)分為三部分:金屬結(jié)合區(qū)(ZincBindingGroup，ZBG)、連接區(qū)（LinkerGroup）和表面識(shí)別區(qū)(SurfaceRecognitionGroup)。通過對(duì)三部分的結(jié)構(gòu)進(jìn)行設(shè)

3、計(jì)，尋找高活性與高選擇性的抑制劑。
　　本論文根據(jù)上市藥物SAHA、FK228及報(bào)道的抑制劑結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，設(shè)計(jì)了兩個(gè)系列化合物。第一系列化合物基于2-氨基-7溴庚酸為骨架，引入不同的疏水結(jié)構(gòu)作為表面識(shí)別區(qū);5個(gè)亞甲基作為連接區(qū);硫代乙?；鳛榻饘俳Y(jié)合區(qū)。第二系列化合物主要以對(duì)苯硝基作為金屬結(jié)合區(qū)。基于以上結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，設(shè)計(jì)出300余種抑制劑小分子，通過Autodock4.2分子對(duì)接軟件初步篩選出13種化合物，并采用多肽液相合成法成功合成了

4、13種化合物10A1-10A6、11B1、12C1-12C2、13-1至16-1。通過了HPLC、ESI-MS、1HNMR與13CNMR的結(jié)構(gòu)驗(yàn)證，與目標(biāo)產(chǎn)物結(jié)構(gòu)一致。
　　目標(biāo)化合物均顯示很好的酶抑制活性。其中第一系列的12C1（IC50=0.045μM）與12C2（IC50=0.092μM）活性最好，在表面識(shí)別區(qū)引入2-氨基-4-苯基噻唑可以提高抑制劑活性。對(duì)HDAC1與HDAC6的抑制活性，與對(duì)HDAC的抑制活性呈現(xiàn)相同趨勢(shì)

5、。
　　在目標(biāo)化合物對(duì)腫瘤細(xì)胞的抗增殖活性實(shí)驗(yàn)中，對(duì)HeLa（宮頸癌細(xì)胞系）的選擇性要高于MCF-7（乳腺癌細(xì)胞系）與SMMC-7721（肝癌細(xì)胞系）。化合物12C1(IC50=40.3μM)對(duì)HeLa的抑制作用優(yōu)于TSA（IC50=48.5μM）。12C1、12C2較對(duì)照TSA的酶抑制活性低10倍，但在細(xì)胞活性實(shí)驗(yàn)中，12C1活性優(yōu)于TSA1.21倍。測(cè)試化合物中的硫代乙?；惢衔锱c對(duì)照TSA分別進(jìn)行抗增殖活性水平與酶抑制活性

6、水平比較，硫代乙酰基類化合物在抗增殖活性水平上比對(duì)照TSA有更高的提升。說明硫代乙酰基在細(xì)胞內(nèi)水解為巰基，促進(jìn)與Zn2+發(fā)生作用，達(dá)到與TSA相同的抑制水平。由于脂溶性，滲透性的原因造成其它化合物的抑制活性不高。
　　通過對(duì)接實(shí)驗(yàn)中的結(jié)合能分析，化合物中可旋轉(zhuǎn)的單鍵數(shù)目過多，與復(fù)合物之間的靜電能作用太大，都不利于與酶的相互作用。HDAC4-HDACIs復(fù)合物之間的對(duì)接能量與HDAC2-HDACIs復(fù)合物具有相同的分布趨勢(shì)。在目標(biāo)化