組蛋白去乙?；敢种苿?duì)腎細(xì)胞癌增殖及凋亡影響.pdf

1、第一部分組蛋白去乙?；冈趪?guó)人腎透明細(xì)胞癌患者中的分布及表達(dá)意義
　　 目的：組蛋白去乙酰化酶(Histone deacetylase，HDAC)的活性增加會(huì)導(dǎo)致實(shí)體性腫瘤更具有侵襲性及促進(jìn)腫瘤進(jìn)展。為了了解組蛋白去乙酰化酶抑制劑(HDACinhibitors)對(duì)腎細(xì)胞癌的抗腫瘤活性，需要首先了解國(guó)人腎細(xì)胞癌中HDAC表達(dá)情況，因此本實(shí)驗(yàn)研究HDAC在國(guó)人腎透明細(xì)胞癌組織標(biāo)本中的表達(dá)水平及活性，以檢驗(yàn)HDAC抑制劑對(duì)我國(guó)腎細(xì)胞癌

2、患者的適用性，為HDACi藥物的選擇提供依據(jù)。
　　 方法：應(yīng)用蛋白印跡技術(shù)檢測(cè)36例腎透明細(xì)胞癌及周圍正常對(duì)照組織中的HDAC1～HDAC3的表達(dá)，酶活性試劑盒檢測(cè)腎透明細(xì)胞癌和周圍正常對(duì)照腎組織中HDAC的活性，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析腫瘤及周圍正常對(duì)照組織中酶活性及表達(dá)的差異。
　　 結(jié)果：國(guó)人腎透明細(xì)胞癌組織標(biāo)本中存在HDAC高表達(dá)，HDAC1，HDAC2，HDAC3表達(dá)率分別為86.1％，88.9％，66.7％；同時(shí)，腎透明

3、細(xì)胞癌組織標(biāo)本中HDAC的酶活性明顯高于周圍正常對(duì)照腎組織，平均增加了81.9％(p<0.0001)；其表達(dá)與患者年齡、腫瘤分級(jí)、分期無相關(guān)性，且HDAC1，2，3之間的表達(dá)也無明顯的相關(guān)性(p>0.05)。
　　 結(jié)論：HDAC1，HDAC2，HDAC3在國(guó)人腎透明細(xì)胞癌組織標(biāo)本中存在高表達(dá)，提示了HDACi對(duì)國(guó)人腎透明細(xì)胞癌患者有治療可能性。
　　 第二部分組蛋白去乙?；敢种苿㏕SA及MS-275對(duì)腎細(xì)胞癌增殖及凋

4、亡影響
　　 目的：研究組蛋白去乙?；敢种苿?HDACi)MS-275及TSA對(duì)腎腫瘤細(xì)胞的殺傷作用，探討其對(duì)腎細(xì)胞癌的細(xì)胞凋亡的影響。
　　 方法：將人腎細(xì)胞癌ACHN細(xì)胞分成不加藥對(duì)照組和不同劑量(0.5、1.0、2.0、4.0、8.0umol/1)MS-275加藥組及(0.05、0.1、0.2、0.4.、0.8umol/l)TSA加藥組，藥物分別作用24h、48h、72h后，MTT法測(cè)定MS-275及TSA對(duì)AC

5、HN的生長(zhǎng)抑制作用，流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況，倒置相差顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)改變，蛋白印跡試驗(yàn)檢測(cè)腎腫瘤細(xì)胞系A(chǔ)CHN內(nèi)的組蛋白3(Histone3)的乙酰化水平。
　　 結(jié)果：MS-275及TSA呈劑量及時(shí)間依賴性殺傷ACHN細(xì)胞，MS-275濃度8umol/l，作用時(shí)間72h，ACHN抑制率達(dá)到了59.6％，TSA濃度0.8umol/l，作用時(shí)間72h，ACHN抑制率為51％，MS-275及TSA組凋亡率較對(duì)照組明顯(p<0.