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1、目的:探討組蛋白去乙?;敢种苿┬炼1桨樊惲u肟酸(suberoylanilide hydroxamic acid,SAHA)對人Burkitt淋巴瘤細胞株Raji細胞凋亡和細胞周期的影響。
方法:采用MTT比色法觀察SAHA、依托泊苷(Etoposide,VP-16)單用及兩者合用對體外培養(yǎng)的Raji細胞凋亡的影響。采用HE染色、熒光染色觀察用藥后細胞形態(tài),用流式細胞儀(Fluorescence Activated Cell
2、 Sorter,F(xiàn)ACS)檢測細胞凋亡率及細胞周期。
結(jié)果:①MTT比色法測定顯示SAHA能抑制Raji細胞增殖,呈劑量依賴性和時間依賴性。②SAHA與VP-16有明顯的協(xié)同作用。用金氏公式判定0.5、1、2、4μmol/L SAHA與5μg/ml VP-16有協(xié)同抑制增殖作用。③流式細胞儀分析,SAHA處理組出現(xiàn)一特征性的亞二倍體凋亡峰。其凋亡率呈時間、劑量依賴性。聯(lián)合用藥時,凋亡率高于單獨用藥組。④流式細胞術(shù)發(fā)現(xiàn)單用SAH
3、A可使Raji細胞阻滯于 G0/G1期,其阻滯細胞的數(shù)量與藥物濃度呈正相關(guān),以作用48小時對細胞周期的阻滯作用最強。聯(lián)合用藥時,細胞周期阻滯作用明顯。
結(jié)論:① SAHA能有效地抑制人Burkitt淋巴瘤細胞株Raji細胞增殖,其抗增殖作用具有時間、劑量依賴性;②SAHA可體外誘導(dǎo)Raji細胞凋亡,并使細胞周期阻滯于G0/G1期,因此,誘導(dǎo)細胞周期阻滯作用可能是SAHA抗腫瘤的一個重要機制;③ SAHA與VP-16聯(lián)合對Raj
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