組蛋白去乙?；敢种苿㏒AHA對人臟靜脈內(nèi)皮細胞血管生成的抑制及其初步機制.pdf

1、目的：
　　通過研究組蛋白去乙?；敢种苿㏒AHA對人臍靜脈內(nèi)皮細胞(human umbilical vein endothelial cell，HUVEC)生物學特性的影響;探究其對血管生成的作用。并進一步探討組蛋白去乙?；敢种苿㏒AHA對血管生成影響的相關(guān)機制。
　　方法：
　　1.CCK-8法檢測SAHA對HUVEC增殖能力的影響。
　　2.流式細胞術(shù)檢測15μM SAHA處理HUVEC48h后細胞周期的

2、分布;Annexin-V/PI雙染色法觀察SAHA對HUVEC的凋亡情況的影響。
　　3.Transwell小室法觀察15μM SAHA處理HUVEC48h后其遷移能力的變化。
　　4.基質(zhì)膠體外成管實驗觀察15μM SAHA處理HUVEC48h后其在基質(zhì)膠上形成管腔樣結(jié)構(gòu)的能力。
　　5.Western-blot法檢測15μM SAHA處理48h后HUVEC細胞中caspase級聯(lián)反應(yīng)相關(guān)蛋白、VEGF信號通路相關(guān)蛋

3、白及P53、P21等蛋白表達的變化。
　　6.基質(zhì)膠體內(nèi)血管生成實驗觀察小鼠體內(nèi)基質(zhì)膠栓中新生血管的數(shù)量從而檢測SAHA對小鼠體內(nèi)血管形成的影響。
　　結(jié)果：
　　1.CCK-8檢測結(jié)果顯示:SAHA能夠抑制HUVEC的增殖，抑制作用隨著劑量的增大、時間的延長而增強。
　　2.流式細胞術(shù)結(jié)果顯示:15μM SAHA處理HUVEC48h后處于S期的細胞比例增加;Annexin-V/PI雙染法結(jié)果顯示SAHA處理后H

4、UVEC細胞凋亡率明顯增高。
　　3.Transwell小室法結(jié)果顯示，15μM SAHA處理HUVEC48h后，與對照組相比較，SAHA處理組遷移過膜的HUVEC細胞數(shù)明顯降低。
　　4.基質(zhì)膠體外成管實驗結(jié)果顯示，15μM SAHA處理HUVEC48小時后，HUVEC形成的管腔樣結(jié)構(gòu)明顯少于對照組。
　　5.15μM SAHA處理HUVEC48h后，Western-blot結(jié)果顯示，SAHA使HUVEC細胞中cas

5、pase級聯(lián)反應(yīng)中的活性蛋白增加，抑制VEGF相關(guān)信號通路，同時SAHA還使HUVEC細胞中P53和P21表達升高。
　　6.基質(zhì)膠體內(nèi)成管實驗結(jié)果顯示，SAHA處理組小鼠體內(nèi)的基質(zhì)膠栓中新生的血管數(shù)明顯少于對照組。
　　結(jié)論：
　　組蛋白去乙?；敢种苿㏒AHA能夠使HUVEC的細胞周期阻滯在S期并促進HUVEC凋亡的發(fā)生從而抑制HUVEC的增殖;同時抑制HUVEC遷移及體內(nèi)外血管腔樣結(jié)構(gòu)的形成;SAHA對HUVEC