組蛋白去乙?；敢种苿┍焖釋Χ喟l(fā)性骨髓瘤細(xì)胞株KM3細(xì)胞增殖的影響.pdf

1、背景：多發(fā)性骨髓瘤(MM)是一種漿細(xì)胞惡性克隆性疾病，骨髓瘤細(xì)胞分泌的血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)以自分泌的方式與MM細(xì)胞表面VEGFR-1/Flt-1結(jié)合，通過細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶(MEK-ERK)和蛋白激酶C(PKC)途經(jīng)分別促進(jìn)MM細(xì)胞增生和遷徙是MM發(fā)病機制之一。丙戊酸(VPA)是一種治療癲癇的傳統(tǒng)藥物，近年研究發(fā)現(xiàn)其具有組蛋白去乙?；?HDACs)抑制劑的作用，可抑制多種腫瘤細(xì)胞增殖。 目的：研究VPA對多發(fā)性骨髓瘤細(xì)

2、胞株KM3細(xì)胞增殖的影響，觀察KM3細(xì)胞中乙?；慕M蛋白H4(Ac-histone H4)和VEGF受體(VEGFR)表達(dá)的變化，探討其抗多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞的分子生物學(xué)機制。 方法：采用四氮唑藍(lán)(MTT)比色法檢測KM3細(xì)胞增殖；AnnexinV和PI染色后應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡率；RT-PCR檢測KM3細(xì)胞中VEGFR mRNA的表達(dá)；采用免疫細(xì)胞化學(xué)法觀察KM3細(xì)胞VEGFR蛋白、Ac-histone H4蛋白的表達(dá)。

3、 結(jié)果：VPA可明顯抑制KM3細(xì)胞增殖，且具有時間劑量依賴性(P<0.05)；不同濃度VPA處理KM3細(xì)胞48h后，可明顯誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，呈劑量依賴性(P<0.05)，不同濃度的VPA(0.5、1、2、4mmol/L)誘導(dǎo)KM3細(xì)胞的凋亡率分別為(11.77±4.64)％、(22.13±1.20)％、(23.95±2.57)％和(42.72±4.61)％，呈劑量依賴性(P<0.05)；RT-PCR結(jié)果顯示，KM3細(xì)胞僅表達(dá)VEGFR-

4、1/flt-1，且VPA能在mRNA水平抑制。VEGFR-1的表達(dá)；免疫細(xì)胞化學(xué)結(jié)果顯示，4mmol/L的VPA作用KM3細(xì)胞48h后，與未處理組KM3細(xì)胞相比較，細(xì)胞中Ac-histone H4吸光度值明顯增加，同時VEGFR-1的吸光度明顯降低(P＜0.05)。 結(jié)論：VPA通過上調(diào)Ac-histone H4水平、下調(diào)KM3細(xì)胞表面VEGFR-1的表達(dá)，從而阻斷骨髓微環(huán)境中VEGF的自分泌促增殖作用發(fā)揮對KM3細(xì)胞的增殖抑制