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文檔簡介
1、目的:
1.觀察氫醌(HQ)作用骨髓單個核細胞后組蛋白去乙?;?HDAC)活性變化。
2.觀察組蛋白去乙酰化酶抑制劑曲古抑菌素(TSA)作用氫醌處理后骨髓單個核細胞中組蛋白去乙?;?(HDAC1)和組蛋白去乙?;?(HDAC2) mRNA表達水平變化。
方法:曲古抑菌素(TSA)作用氫醌處理的骨髓單個核細胞,提取細胞核蛋白和RNA,應用去乙?;?HDAC)試劑盒檢測酶活性變化,PT-PC
2、R檢測HDAC1和HDAC2mRNA表達水平。
結果:
1.氫醌作用骨髓單個核細胞,HDAC活性增高。3h,6h,12h分別為對照組的1.31倍,1.53倍,1.148倍,各組與對照組相比,有統(tǒng)計學意義(P<0.05),24h組與0h對照組相比無明顯差異(P>0.05)。
2.TSA作用氫醌處理的骨髓單個核細胞10h時結果顯示,HQ+TSA組比HQ組的HDAC酶活性降低25.6%(P<0.05)
3、;與對照組相比,略升高11.5%(P<0.05);各組間差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
3.RT-PCR結果顯示,氫醌作用骨髓單個核細胞,在0~12h范圍內,HDAC1和HDAC2的mRNA水平均有增加。除24 h組(P>0.05)外,HDAC1mRNA的表達量3h,6h,12h組分別為0h對照組的1.173倍,1.901倍,2.348倍(P<0.05),各組間差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。HDAC2 mRNA的
4、表達量在3h和24h組與對照組相比,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),其6h組和12h組表達量為1.426倍,1.766倍。
4.RT-PCR結果顯示,TSA作用氫醌處理的骨髓單個核細胞10h,HQ+TSA組比HQ組的HDAC1mRNA表達水平下降26.9%,HDAC2mRNA表達水平下降19.3%,各組間差異有有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
結論:
1.在一定時間范圍內,氫醌作用骨髓單個核細胞
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