類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎外周血單個(gè)核細(xì)胞的組蛋白乙?；芯?pdf

1、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis，RA)是一種常見的全身性自身免疫疾病，以慢性、進(jìn)行性、侵襲性關(guān)節(jié)炎為主要臨床表現(xiàn)。該病發(fā)病機(jī)制尚不明確，研究其發(fā)病機(jī)制對(duì)臨床指導(dǎo)治療具有極其深遠(yuǎn)的意義。組蛋白乙酰化在RA的發(fā)病機(jī)制中具有重要作用。組蛋白乙?；且环N可逆的動(dòng)態(tài)過程，主要由組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶(histone acetylase，HATs)和組蛋白去乙酰化酶(histonedeacetylases，HDACs)協(xié)調(diào)修飾。既

2、往研究中，Huber，L.C.等人的研究顯示，HDAC1在RA滑膜組織中的表達(dá)較OA和健康對(duì)照組是降低的，并且HDACs總體活性減低，而后來Tomoko Kawabata等人的研究結(jié)果與之恰恰相反，結(jié)果顯示HDAC1在RA滑膜組織中的表達(dá)是增高的，且HDACs總體活性增高。據(jù)既往研究推測(cè)，恢復(fù)HDACs活性可能對(duì)RA的治療有所幫助，但也有研究指出組蛋白去乙酰化酶抑制劑(histone deacetylase inhibitors，HDA

3、Ci)在治療動(dòng)物模型的關(guān)節(jié)炎和其他慢性炎癥中取得了良好的成效，以上研究結(jié)果及結(jié)論存在矛盾。再者，組蛋白乙酰化作用在RA外周血單個(gè)核細(xì)胞(peripheral blood mononuclear cells，PBMCs)中的研究相對(duì)較少，僅有Eric Toussirot等學(xué)者研究了RA患者PBMCs中HATs與HDACs的失衡等報(bào)道，但并沒有分析PBMCs中HDACs的表達(dá)情況。因此，我們?cè)诖舜握n題中，研究了RA外周血PBMCs中HDAC

4、s的表達(dá)，并檢測(cè)其HDACs總體活性，分析HDACs的表達(dá)和HDACs總體活性與RA疾病活動(dòng)度指標(biāo)的相關(guān)性，從而初步明確組蛋白乙?；揎椩赗A患者PBMCs中的作用，進(jìn)一步揭示RA的發(fā)病機(jī)制。
　　目的：明確RA患者PBMCs中HDACs的表達(dá)及其總體活性，并分析HDACs的表達(dá)及總體活性與RA疾病活動(dòng)度指標(biāo)之間的關(guān)系，從而進(jìn)一步揭示RA的發(fā)病機(jī)制。
　　方法：分別采集年齡及性別相當(dāng)?shù)念愶L(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者34名（實(shí)驗(yàn)組）及健康

5、參與者34名（對(duì)照組）外周血，分離出PBMCs，提取其RNA及總蛋白、核蛋白，采用熒光定量PCR(qPCR)及免疫印跡法(western blot)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)樣本HDACs的表達(dá)情況;應(yīng)用HDAC Assay Kit試劑盒檢測(cè)其HDACs總體活性，統(tǒng)計(jì)RA患者ESR、CRP、DAS28等疾病活動(dòng)度相關(guān)臨床資料，并分析HDACs的表達(dá)及總體活性與RA相關(guān)疾病活動(dòng)度指標(biāo)之間的相關(guān)性。
　　結(jié)果：結(jié)果顯示，RA患者外周血PBMCs中HDA

6、C1、HDAC2在mRNA和蛋白水平上的表達(dá)較健康對(duì)照組明顯減低(p＜0.05)，雖隨RA疾病活動(dòng)度指標(biāo)ESR、CRP、DAS28的增高而降低，但不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。RA患者PBMCs細(xì)胞核中HDACs的總體活性較健康對(duì)照組明顯降低(p=0.0001)，并且隨RA疾病活動(dòng)度指標(biāo)ESR、CRP的增高而降低(P＜0.05)，雖也隨著DAS28的增高而降低，但不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　結(jié)論：HDAC1、HDA